Anticorpo policlonale coniglio Anti-TOP1MT per WB, IHC-P, ELISA - Q969P6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TOP1MT

• Il gene TOP1MT codifica per la topoisomerasi I del DNA mitocondriale, un enzima chiave responsabile della rimozione del superavvolgimento e della tensione torsionale durante la replicazione e la trascrizione del DNA mitocondriale (UniProtKB: Q969P6).
• L'enzima agisce mediante la scissione transitoria di un filamento di DNA tramite una reazione di transesterificazione, formando un intermedio covalente DNA-(3'-fosfotirosil)-enzima, che permette al filamento libero di ruotare e risolvere i superavvolgimenti prima della ricollegamento (Per similarità).
• TOP1MT è localizzato esclusivamente nel mitocondrio, dove svolge un ruolo fondamentale nel mantenimento della topologia del DNA mitocondriale.
• L'espressione è ubiquitaria, con i livelli più alti osservati nel muscolo scheletrico, cuore, cervello e fegato fetale.
• Come topoisomerasi di tipo IB, TOP1MT contiene un dominio di legame al DNA e un residuo di tirosina catalitico essenziale per la sua attività; le parole chiave includono isomerasi, legame al DNA e topoisomerasi.
• L'insplicing alternativo del gene TOP1MT produce multiple varianti di trascritto, che contribuiscono potenzialmente alla diversità funzionale.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 470-550) di TOP1MT umano, il che indica che l'anticorpo può rilevare isoforme complete e contenenti la porzione C-terminale; verificare la reattività incrociata con le isoforme di ratto tramite allineamento di sequenza.
• Per il Western blotting, una banda prevista vicino a 70 kDa è tipica; ottimizzare il trasferimento per proteine ad alto peso molecolare e utilizzare campioni arricchiti di mitocondri per un segnale migliore.
• Nell'analisi immunoistochimica (IHC-P, prevedere pattern di colorazione mitocondriale; includere controlli appropriati e ottimizzare il recupero dell'antigene per antigeni mitocondriali.
• Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando modelli knockout o knockdown per minimizzare la potenziale reattività incrociata con topoisomerasi nucleari come TOP1.
• Per ELISA, l'anticorpo può legare TOP1MT ricombinante o purificato; considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione corrispondente per lo sviluppo di sandwich ELISA.

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