Anticorpo policlonale anti-Topo IIα per WB, IHC-P, ELISA - P11388

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Topo IIα

• La DNA topoisomerasi 2-alfa (Topo IIα), codificata dal gene TOP2A, è un enzima critico dipendente da ATP che modula la topologia del DNA tagliando e religando transientemente il DNA a doppia elica, permettendo il passaggio di un duplex attraverso un altro (PubMed:17567603, PubMed:18790802, PubMed:22013166). Riferimenti correlati: PMID:17567603 PMID:18790802 PMID:22013166
• La Topo IIα è localizzata prevalentemente nel nucleo, con arricchimento nel nucleoplasma e nel nucleolo; viene rilevata anche nel citoplasma, in particolare durante la divisione cellulare.
• È ampiamente espressa nei tessuti proliferativi come tonsilla, milza, linfonodo, timo e testicolo, ed è notevolmente sovraespressa nei linfomi di alto grado, nei tumori polmonari a cellule squamose e nei seminomi (PubMed:9155056). Riferimenti correlati: PMID:9155056
• Le modificazioni post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, l'acetilazione e l'ubiquitinazione, regolano l'attività, la stabilità e la localizzazione cellulare della Topo IIα.
• La proteina presenta splicing alternativo, producendo multiple isoforme con pesi molecolari compresi tra 174 e 182 kDa.
• La Topo IIα può anche partecipare alla regolazione del ritmo circadiano influenzando la durata del periodo dell'oscillazione trascrizionale di BMAL1 (Per somiglianza).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione C-terminale (aa 1431-1531), che può fornire un'elevata specificità per la Topo IIα.
• Per il Western blot, a causa delle grandi dimensioni della proteina (~174-182 kDa), ottimizzare le condizioni di trasferimento delle proteine (es. percentuale di metanolo inferiore, tempo di trasferimento esteso) e verificare le bande con appropriati standard di peso molecolare.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), considerare i protocolli di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e titolare l'anticorpo per minimizzare il background.
• Per le applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale può potenziare la specificità nei saggi sandwich.
• La reattività crociata è validata per campioni umani; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza dell'immunogeno prima dell'uso.

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