Anticorpo policlonale di coniglio Anti-TPSAB1 per WB e ELISA - Q15661

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TPSAB1

• TPSAB1 codifica per la triptasi alfa/beta-1, nota anche come triptasi I o triptasi alfa-1, che è la principale proteasi neutra immagazzinata nei granuli secretori dei mastociti.
• La triptasi viene secreta in seguito all'attivazione e alla degranulazione dei mastociti e può svolgere un ruolo nell'immunità innata. L'isoforma 2 taglia substrati di grandi dimensioni come la fibronectina in modo più efficiente rispetto all'isoforma 1, ma è meno efficiente verso substrati di piccole dimensioni.

Riferimenti bibliografici correlati: PMID:18854315

• Il gene va incontro a splicing alternativo, producendo due isoforme (isoforma 1 e isoforma 2) con specificità per il substrato e modelli di espressione distinti.
• A livello subcellulare, la triptasi viene secreta, in coerenza con il suo ruolo di proteasi extracellulare rilasciata dai mastociti.
• L'isoforma 1 è espressa prevalentemente nel polmone, stomaco, milza, cuore e pelle, mentre l'isoforma 2 si trova nell'aorta, milza e tumore mammario, in particolare nelle cellule endoteliali piuttosto che nei mastociti.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono legami disolfuro, glicosilazione e un peptide segnale N-terminale; la proteina è sintetizzata come zimogeno che richiede attivazione proteolitica.
• Il peso molecolare calcolato è di circa 30,5 kDa (UniProt), spesso osservato a ~31 kDa in gel denaturanti a causa delle modifiche post-traduzionali.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre la regione amminoacidica 31–275 di TPSAB1 umano. Convalidare la specificità dell'anticorpo eseguendo un saggio di blocco con peptide o confrontando i segnali tra campioni con sovraespressione di TPSAB1 e campioni con silenziamento del gene.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 31 kDa; tuttavia, trattandosi di un anticorpo policlonale, si possono osservare bande aggiuntive. Utilizzare controlli di caricamento appropriati e prevedere il blocco della membrana con il 5% di latte scremato in polvere.
• Per ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e le concentrazioni di anticorpo utilizzando TPSAB1 ricombinante o proteina nativa presente nei campioni biologici.
• Questo anticorpo mostra reattività crociata con topo e ratto, rendendolo adatto per studi traslazionali, ma verificare la reattività nel tuo modello sperimentale specifico.
• Conservare l'anticorpo a -20°C ed evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento per mantenere l'attività.

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