Anticorpo monoclonale anti-fattore di trascrizione AP-2-alfa (TFAP2A) per WB, ELISA - P05549

Specifiche e parametri fondamentali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del fattore di trascrizione AP-2-alfa

• Il fattore di trascrizione AP-2-alfa (TFAP2A) è una proteina che si lega al DNA in modo sequenza-specifico e regola la trascrizione legandosi al motivo consenso 5'-GCCNNNGGC-3' nei promotori dei geni bersaglio.
• AP-2-alfa attiva geni essenziali per il corretto sviluppo dell'occhio, del viso, della parete corporea, degli arti e del tubo neurale, ed è l'unica proteina AP-2 necessaria per la morfogenesi precoce della vescicola del cristallino.
• Funziona anche come repressore trascrizionale, sopprimendo geni quali MCAM/MUC18 e C/EBP alfa, e regola negativamente la segnalazione canonica Wnt; AP-2-alfa è un repressore trascrizionale di MYC. Riferimenti correlati: PMID:33000225
• La proteina è localizzata nel nucleo, dove si associa alla cromatina; insieme al coattivatore CITED2, stimola l'attivazione trascrizionale del promotore PITX2 P1.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la formazione di legami isopeptidici (coniugazione Ubl), suggerendo meccanismi regolatori complessi.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme di AP-2-alfa, ampliandone la diversità funzionale.
• Le mutazioni in TFAP2A sono associate alla sindrome branchio-oculo-facciale (BOFS), evidenziandone il ruolo nei disturbi dello sviluppo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico comprendente gli amminoacidi 50–150 di AP-2-alfa umano; questa regione potrebbe essere conservata nel topo, in accordo con la reattività crociata riportata.
• Per il Western blot (WB), si prevede una banda intorno a 48 kDa; si consiglia di utilizzare lisati arricchiti in frazione nucleare per migliorare il rilevamento di questo fattore di trascrizione.
• Nell'ELISA, l'immunogeno peptidico può fungere da controllo positivo, ma si raccomanda la validazione finale con proteina ricombinante o lisati cellulari.
• Poiché AP-2-alfa è coinvolto nello sviluppo precoce e nell'oncogenesi, si consiglia di includere nei test controlli positivi appropriati (ad es. HeLa, MCF-7) e controlli negativi.

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