Anticorpo policlonale di coniglio anti-TRIF/TICAM1 per WB, ELISA - Q8IUC6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TRIF/TICAM1

• TRIF/TICAM1 è una molecola adattatrice contenente un dominio TIR, essenziale per l'immunità innata contro i patogeni, che agisce a valle dei recettori Toll-like (TLR) e dei sensori citosolici.
• Il legame del ligando a TLR3, TLR4 (tramite TICAM2) o TLR5 induce il reclutamento di TRIF attraverso il suo dominio TIR, attivando NF-kappa-B, i fattori di trascrizione IRF e l'apoptosi (PubMed:12471095, PubMed:12539043, PubMed:14739303). Riferimenti correlati: PMID:12471095, PMID:12539043, PMID:14739303
• Attraverso distinti motivi di interazione, TRIF assembla complessi di segnalazione contenenti TBK1, TRAF6 e RIPK1, che attivano rispettivamente IRF3/IRF7, NF-kappa-B e l'apoptosi mediata da FADD (PubMed:12471095, PubMed:12539043, PubMed:14739303). Riferimenti correlati: PMID:12471095, PMID:12539043, PMID:14739303
• La fosforilazione mediata da TBK1 del motivo pLxIS in TRIF consente il legame e l'attivazione di IRF3, portando alla produzione di interferoni di tipo I, fondamentali per la difesa antivirale (PubMed:25636800). Riferimenti correlati: PMID:25636800
• TRIF partecipa inoltre a un complesso multi-elicasico che funge da sensore citoplasmatico dell'RNA virale a doppio filamento, inducendo la produzione di citochine pro-infiammatorie (per similarità).
• TRIF è presente nelle vescicole citoplasmatiche, negli autofagosomi, nel citosol e nei mitocondri, in linea con il suo ruolo in molteplici piattaforme di segnalazione.
• Espresso ubiquitariamente, TRIF mostra livelli elevati nel fegato ed è soggetto a modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione e ubiquitinazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 20–200 della regione N-terminale di TRIF/TICAM1 umano (NP_891549.1), che si prevede sia altamente antigenica e conservata tra le specie specificate per la reattività crociata (uomo, topo, ratto).
• Per il Western blot (WB), rilevare una banda predominante intorno a 76 kDa; considerare l'utilizzo di adeguati controlli di caricamento delle proteine e validare il prodotto in lisati di cellule stimolate con TLR.
• Per l'ELISA, l'anticorpo policlonale di coniglio può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate empiricamente utilizzando la proteina TRIF ricombinante o il bersaglio naturale proveniente da campioni umani, di topo o di ratto.
• Data la natura policlonale, possono essere riconosciuti epitopi multipli; includere un controllo negativo (ad esempio, un lisato knockout per TRIF) per confermare la specificità.

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