Anticorpo policlonale Anti-TRIM23 per WB, IF/ICC, ELISA - P36406

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TRIM23

• TRIM23 (proteina contenente motivo tripartito 23), nota anche come ARD1, ARFD1 e RNF46, è un membro della famiglia di proteine TRIM caratterizzata da un dominio dito RING N-terminale, segmenti a elica avvolta (coiled-coil) e un dominio C-terminale del fattore di ADP-ribosilazione (ARF) che presenta attività GTPasica.
• TRIM23 è essenziale per l'attivazione dell'autofagia durante l'infezione virale. Promuove la dimerizzazione della chinasi 1 legante TANK (TBK1), consentendo la successiva fosforilazione del recettore selettivo dell'autofagia SQSTM1, un passaggio chiave nella formazione degli autofagosomi. Il dominio ARF di TRIM23 subisce auto-ubiquitinazione legata a 'Lys-27' per stimolare la sua attività GTPasica e il reclutamento sulle membrane autofagosomiali. Riferimenti correlati: PMID:31189704, PMID:40360474, PMID:28871090
• In condizioni di stress energetico cellulare, TRIM23 catalizza la poli-ubiquitinazione legata a 'Lys-63' di HAX1, innescando la sua separazione di fase liquido-liquido e contribuendo all'assemblaggio dei corpi di elaborazione citoplasmatica (P-bodies). Riferimenti correlati: PMID:38769438
• Nel contesto delle interazioni ospite-microbo, TRIM23 media l'auto-ubiquitinazione di TRAF6 in presenza della proteina UL144 del citomegalovirus umano (HCMV), portando all'attivazione controllata dal virus della segnalazione NF-κB.
• A livello subcellulare, TRIM23 si localizza principalmente nel citoplasma, con associazione all'apparato di Golgi e alle membrane dei lisosomi; si sposta anche nei P-bodies in risposta a specifici stimoli di stress.
• Ulteriori modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la proteina possiede motivi a dito di zinco per il coordinamento dei metalli; lo splicing alternativo genera multiple isoforme.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai 280 amminoacidi N-terminali di TRIM23 umano, suggerendo una reattività con la regione N-terminale. Per il western blot, è prevista una banda intorno a 64 kDa; considerare l'uso di lisati da linee cellulari umane, murine o di ratto.
• Per l'immunofluorescenza, prevedere pattern di colorazione citoplasmatica e associata al Golgi; studi di co-localizzazione con marcatori di organelli possono validare ulteriormente la distribuzione subcellulare.
• Data la natura policlonale, la coerenza tra i lotti deve essere verificata. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ogni applicazione tramite esperimenti di titolazione nel proprio sistema di campioni.
• Quando si indagano le vie dell'autofagia o dell'ubiquitinazione, includere controlli appropriati come inibitori dell'autofagia, inibitori del proteasoma o modelli di knockdown per confermare la specificità.

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