Anticorpo policlonale anti-TRIM25 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q14258

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di TRIM25

• Codifica per una ligasi E3 ubiquitina/ISG15 che svolge un ruolo fondamentale nell'immunità innata mediando la poliubiquitinazione legata a 'Lis-63' di RIG-I (DDX58) e IFIH1 (MDA5), che porta alla produzione di interferoni di tipo I in seguito a infezione virale. Riferimenti correlati: PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849

• Funziona come proteina responsiva agli estrogeni, mediando l'azione estrogenica attraverso l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomiale di ZFHX3, collegando così la segnalazione ormonale al riciclo proteico. Riferimenti correlati: PMID:22452784

• Agisce come ligasi E3 ISG15, promuovendo l'ISGilazione di 14-3-3 sigma (SFN) e partecipando a vie di ISGilazione più ampie. Riferimenti correlati: PMID:16352599, PMID:17069755

• Media la poliubiquitinazione legata a 'Lis-63' della proteina antivirale ZAP/ZC3HAV1, processo necessario per un legame ottimale con l'mRNA virale bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:28060952, PMID:28202764

• Promuove il riavvio delle forcelle di replicazione bloccate interagendo con lo scaffold KHDC3L-OOEP e ubiquitinando l'elicasi BLM, facilitando il reclutamento di BLM nei siti di danno al DNA.

• È coinvolto nella soppressione dell'autofagia ubiquitinando e degradando il recettore dell'autofagia p62/SQSTM1. Riferimenti correlati: PMID:40542578

• Ubiquitina substrati coinvolti nella formazione di granuli di stress, nel degrado di mRNA senza senso, nella sintesi di nucleosidi e nella traduzione/stabilità dell'mRNA, come dimostrato da studi proteomici. Riferimenti correlati: PMID:36067236

• Subcellularmente si localizza nel citoplasma, nei granuli di stress e nel nucleo, riflettendo i suoi diversi ruoli funzionali. Appartiene alla famiglia delle proteine TRIM caratterizzate da un dito RING, uno o più zinc-finger B-box e un dominio a coil avvolto.

• È espresso in modo ubiquitario, con una notevole espressione a livello proteico nei tumori della mammella.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blotting, aspettate una banda vicino a 71 kDa; utilizzate controlli positivi appropriati come lisati di cellule HeLa e validate con un peptide di blocco o un controllo di knockdown.
• Negli esperimenti IHC-P, considerate di ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6.0) e validate con tessuti noti per essere positivi per TRIM25 come il carcinoma mammario.
• Per IF/ICC, testate i protocolli di fissazione/permeabilizzazione (es. metanolo vs. PFA/Triton) poiché diverse localizzazioni (citoplasma, granuli di stress, nucleo) possono richiedere condizioni personalizzate.
• Questo anticorpo policlonale reagisce in modo crociato con topo e ratto; verificate la reattività specie-specifica nel vostro sistema sperimentale confrontando l'omologia di sequenza della regione dell'immunogeno.
• Per l'IP, titolate attentamente l'anticorpo per minimizzare il legame non specifico; includete un controllo dell'isotipo e una fase di pre-purificazione.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare della copertura con il frammento di immunogeno; confermate linearità e specificità utilizzando la proteina ricombinante TRIM25.

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