Anti-TRIM32 Coniglio Anticorpo Policlonale per WB, ELISA - Q13049

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TRIM32

• TRIM32 (Proteina contenente motivo tripartito 32) è una ligasi E3 ubiquitina-proteina da 72 kDa codificata dal gene TRIM32, nota anche come HT2A, BBS11, TATIP, LGMD2H e LGMDR8. Appartiene alla famiglia TRIM caratterizzata da domini dito a RING, B-box e a ricciolo (coiled-coil).
• Come ligasi E3 ubiquitina, TRIM32 media sia la poliubiquitinazione legata a 'Lys-48' che quella legata a 'Lys-63' di diversi substrati. Ad esempio, promuove l'ubiquitinazione legata a 'Lys-63' di STING1, facilitando l'interazione STING1-TBK1 e l'induzione a valle di IFN-β. Riferimenti correlati: PMID:22745133
• TRIM32 regola positivamente l'autofagia attraverso molteplici meccanismi: forma catene poliubiquitina legate a 'Lys-63' non ancorate che attivano ULK1 in complesso con AMBRA1, e sotto stress metabolico, TRIM32 fosforilata da CHK2 ubiquitina ATG7 in 'Lys-45' per avviare l'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:31123703, PMID:37943659
• Nell'immunità innata, TRIM32 esplica funzioni regolatorie sia positive che negative. Innesca la degradazione autofagica di TICAM1 (TRIF) per smorzare le risposte infiammatorie mediate da TLR3/4, mentre nell'infezione batterica, promuove la clearance mediata dall'autofagia del Mycobacterium tuberculosis nei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:28898289, PMID:37543647
• TRIM32 si localizza nel citoplasma, mitocondri e reticolo endoplasmatico, ed è espresso nella milza, timo, prostata, testicolo, ovaio, intestino, colon e muscolo scheletrico, coerente con i suoi ruoli nella funzione immunitaria e muscolare.
• Le mutazioni in TRIM32 sono associate a malattie umane tra cui la sindrome di Bardet-Biedl (BBS11), la distrofia muscolare degli arti e della cintura di tipo 2H (LGMD2H/LGMDR8) e la disabilità intellettiva, evidenziando la sua importanza nello sviluppo e nell'omeostasi tissutale.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali come acetilazione e fosforilazione; la fosforilazione mediata da CHK2 ai residui di serina sotto stress metabolico è critica per la sua funzione autofagica. Riferimenti correlati: PMID:37943659
• TRIM32 è stato originariamente identificato come proteina interagente con Tat e potrebbe mediare l'attività biologica di HIV-1 Tat in vivo, interagendo anche con le proteine Tat di HIV-2 ed EIAV. Riferimenti correlati: PMID:7778269

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi N-terminali 1-280 del TRIM32 umano, che comprende i domini RING e B-box. Questa regione è relativamente conservata; pertanto, si prevede che l'anticorpo cross-reagisca con TRIM32 di topo e ratto come indicato. Per il Western blotting, si prevede una banda principale vicino a 72 kDa nei lisati da tessuti umani, di topo o di ratto come muscolo scheletrico, cervello o milza. Considerare l'uso di controlli positivi e negativi appropriati per validare la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, la natura policlonale di questo anticorpo può fornire una sensibilità migliorata per la cattura o il rilevamento. Tuttavia, si consiglia di ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento nel formato specifico del saggio, e di validare le prestazioni con proteina ricombinante o campioni positivi noti.
• Data la partecipazione di TRIM32 all'autofagia e alla segnalazione immunitaria, il trattamento delle cellule con stimoli specifici (es. stress metabolico, infezione virale) può alterare i livelli di espressione o le modificazioni post-traduzionali, il che potrebbe influenzare il rilevamento. Considerare queste variabili durante la progettazione degli esperimenti.

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