Anticorpo policlonale coniglio anti-TRIM45 per IF/ICC ed ELISA - Q9H8W5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TRIM45

• TRIM45, noto anche come RNF99, è una ligasi E3 ubiquitina-proteina che appartiene alla famiglia del motivo tripartito (TRIM), caratterizzata da un dominio dito RING, B-box e regione a elica idrofilica (coiled-coil). È coinvolto nella regolazione delle risposte infiammatorie.
• TRIM45 media la poliubiquitinazione legata a 'Lys-48' di TAB2, una proteina regolatrice della chinasi TAK1, mirandola per la degradazione proteasomica. Questo processo inibisce la segnalazione immunitaria infiammatoria mediata dai TLR.
  Riferimenti correlati: PMID:36681779
• Può anche funzionare come un repressore trascrizionale nella via di segnalazione delle chinasi attivate da mitogeni (MAPK).
• Si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, coerentemente con i suoi ruoli nella trasduzione del segnale e nella regolazione trascrizionale.
• È espresso in molteplici tessuti, inclusi il muscolo scheletrico, il cervello, il cuore e il pancreas.
• Esibisce splicing alternativo, producendo multiple isoforme che possono avere proprietà funzionali distinte.
• La proteina contiene motivi a dito di zinco (incluso il dominio RING), una regione coiled-coil e subisce modificazioni post-traduzionali come l'ubiquitinazione, che sono critiche per la sua attività di ligasi e l'interazione con i substrati.
• Con un peso molecolare previsto di circa 64 kDa (64359 Da), TRIM45 è soggetto a degradazione proteasomica stessa ed è identificato negli studi proteomici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo policlonale è stato sviluppato contro una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 100–400 di TRIM45 umano, una regione che probabilmente comprende domini funzionali; può essere utilizzato per applicazioni di immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC) ed ELISA.
• Per IF/ICC, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per rilevare TRIM45 sia nei compartimenti citoplasmatici che nucleari. Considerare l'uso di controlli di isotipo appropriati.
• Nell'ELISA, validare l'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento nella matrice di campione specifica (es. lisati cellulari, estratti tissutali) per garantire sensibilità e specificità.
• L'anticorpo cross-reagisce con TRIM45 di topo, consentendo il suo utilizzo negli studi su modelli murini; tuttavia, verificare la reattività crociata nel proprio setup sperimentale.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità lotto-per-lotto; i nuovi lotti devono essere validati per coerenza nei propri saggi.

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