Anticorpo policlonale Anti-TRIP12 per WB, IHC-P, ELISA - Q14669

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TRIP12

• L'E3 ubiquitina-proteina ligasi TRIP12 catalizza l'ubiquitinazione dei substrati e svolge un ruolo centrale nella via di degradazione per fusione dell'ubiquitina (UFD), mediando l'ubiquitinazione N-terminale indipendentemente dalla disponibilità di residui di lisina. Riferimenti correlati: PMID:19028681

• TRIP12 agisce come soppressore chiave della segnalazione ubiquitinica dipendente da RNF168 nei siti di danno del DNA, prevenendo la diffusione eccessiva degli istoni H2A e H2AX ubiquitinati legati a Lys-63 e protegge quindi l'integrità della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:22884692 PMID:40419785

• In condizioni normali, TRIP12 media l'ubiquitinazione e la degradazione del soppressore tumorale privo di lisine p19ARF/ARF (isoforma CDKN2A), contribuendo alla regolazione di p53/TP53; nelle cellule tumorali, la separazione compartimentale previene questa degradazione. Riferimenti correlati: PMID:20208519

• Altri substrati includono NAE1 e SMARCE1, la cui ubiquitinazione da parte di TRIP12 li indirizza al turnover proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:18627766

• Partners di interazione come MYC, TRADD e SMARCC1 possono interrompere il legame di TRIP12 alle proteine bersaglio, fornendo un ulteriore livello di controllo regolatorio sulla degradazione dei substrati. Riferimenti correlati: PMID:20829358

• TRIP12 ubiquitina anche ASXL1 dopo il legame al DNA metilato in N6-metiladenosina, portando alla degradazione di ASXL1 e alla successiva inattivazione del complesso PR-DUB. Riferimenti correlati: PMID:30982744

• TRIP12 è localizzato prevalentemente nel nucleoplasma, dove svolge le sue funzioni nucleari nella riparazione del DNA e nel controllo della qualità delle proteine.

• La proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, e appartiene alla famiglia delle E3 ubiquitina transferasi di tipo HECT; le mutazioni in TRIP12 sono associate ai disturbi dello spettro autistico e alla disabilità intellettiva.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-240) di TRIP12 umano, rendendo l'anticorpo potenzialmente adatto a rilevare sia la proteina full-length che le isoforme N-terminali.
• Per il western blot è prevista una banda predominante a circa 220 kDa; a causa dell'elevato peso molecolare, si consiglia l'uso di gel a gradiente e tempi di trasferimento prolungati.
• Nell'immunistochimica (sezioni incluse in paraffina), le condizioni di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo primario devono essere ottimizzate empiricamente; controlli appropriati sono essenziali per confermare la colorazione nucleare.
• Per le applicazioni ELISA può essere utile una titolazione accurata sia dell'anticorpo di cattura che di quello di rilevamento.

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