Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-TrkB (GP145-TrkB) per WB e ELISA - Q16620

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di TrkB

• TrkB (conosciuto anche come GP145-TrkB, NTRK2) è un recettore tirosin-chinasi appartenente alla famiglia dei recettori tirosin-chinasi neurotrofici. Esistono diverse isoforme, tra cui TrkB a lunghezza completa, TrkB-T1 e TrkB-T-Shc; TrkB è la forma predominante nel sistema nervoso.
• Dopo il legame con i suoi ligandi — il fattore neurotrofico derivato dal cervello (BDNF), la neurotrofina-4 (NTF4) e con minore affinità la neurotrofina-3 (NTF3) — TrkB forma omodimeri e subisce autofosforilazione. Questa attivazione innesca diverse vie di segnalazione a valle, tra cui la cascata GRB2-Ras-MAPK (che regola la differenziazione neuronale e la crescita dei neuriti), la cascata PI3K-AKT (che promuove sopravvivenza e crescita) e le vie mediate da PLCγ (che influenzano la plasticità sinaptica). Riferimenti bibliografici: PMID:15494731 PMID:7574684
• TrkB svolge un ruolo fondamentale nello sviluppo e nella maturazione dei sistemi nervosi centrale e periferico, regolando sopravvivenza, proliferazione, migrazione e differenziazione neuronale e formazione delle sinapsi. Contribuisce all'apprendimento e alla memoria modulando sia la funzione sinaptica a breve termine sia la potenziamento a lungo termine.
• Subcellularmente, TrkB è localizzato sulla membrana cellulare, oltre che negli endosomi precoci, nelle proiezioni assonali e dendritiche e nella densità postsinaptica. Si osserva anche una frazione citoplasmatica perinucleare.
• L'espressione di TrkB è abbondante nel SNC (corteccia cerebrale, ippocampo, talamo, cervelletto, tronco encefalico, midollo spinale) e nel SNP (gangli cranici, gangli della radice dorsale). L'isoforma TrkB-T1 si trova inoltre in tessuti non neuronali come pancreas, rene e cuore.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione dipendente dal ligando e ubiquitinazione. Le mutazioni di NTRK2 sono associate a encefalopatie dello sviluppo (ad esempio DEE58, EIEE58) e obesità.
• TrkB sopprime l'anoikis e media la segnalazione del calcio dipendente dalle neurotrofine nelle cellule gliali, facilitando la comunicazione tra neuroni e glia.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 32–430 di TrkB umano, una regione all'interno del dominio extracellulare. È previsto che questo anticorpo riconosca l'isoforma di TrkB a lunghezza completa e potenzialmente altre isoforme che condividono questa sequenza.
• Per Western blotting, il peso molecolare previsto per l'isoforma canonica di TrkB è di circa 92 kDa. A causa della glicosilazione e dello splicing alternativo, possono comparire bande di dimensioni diverse (ad esempio TrkB-T1 a ~95 kDa). Utilizzare controlli positivi appropriati come linee cellulari neuronali (ad esempio SH-SY5Y, PC12) o lisati di tessuto cerebrale.
• Secondo il fornitore, l'anticorpo ha reattività incrociata con TrkB di topo e ratto. Si consiglia di verificare la reattività nella vostra specifica matrice di campione.
• Per applicazioni ELISA, utilizzare proteina TrkB ricombinante come standard e ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, offre consistenza tra lotti. Validare la diluizione di lavoro nel vostro sistema sperimentale, poiché le concentrazioni ottimali possono variare.

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