Anticorpo policlonale anti-TRPM2 da coniglio per WB, IF-P, ELISA - O94759

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TRPM2

• TRPM2 (Transient receptor potential cation channel subfamily M member 2, canale cationico del sottogruppo M della famiglia dei canali cationici a potenziale transitorio 2) è un canale cationico non selettivo e indipendente dalla tensione di membrana che media l'influsso di Na+ e Ca2+, aumentando così i livelli di calcio citoplasmatico. Riferimenti bibliografici: PMID:11385575 PMID:11509734 PMID:11804595

• L'attivazione del canale è indotta da ADP-ribosio intracellulare, Ca2+, temperatura calda e stress ossidativo; il legame dell'ADP-ribosio al dominio Nudix induce un cambiamento conformazionale che predispone il canale all'apertura dipendente dal calcio. Riferimenti bibliografici: PMID:19171771 PMID:25620041 PMID:28775320 PMID:20650899 PMID:25918360

• Il gene codifica per diverse isoforme: l'isoforma 1 è il canale funzionale a lunghezza completa; l'isoforma 2 non possiede attività canalare; l'isoforma 3 agisce come regolatore negativo dell'isoforma 1 e protegge dalla morte cellulare indotta dallo stress ossidativo.

• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, i lisosomi, le vescicole citoplasmatiche e le proiezioni cellulari (es. filopodia), in linea con il suo ruolo nel flusso ionico e nella segnalazione organellare.

• TRPM2 è espresso ad alti livelli nel cervello e nelle cellule del sangue periferico (specialmente nei neutrofili; è inoltre rilevabile nel midollo osseo, nella milza, nel cuore, nel fegato e nel polmone.

• Il canale contribuisce a diversi processi dipendenti dal calcio, tra cui la secrezione di insulina, le risposte immunitarie innate (es. fagocitosi e rilascio di citochine), la differenziazione delle cellule dendritiche e la riorganizzazione del citoscheletro. Riferimenti bibliografici: PMID:22493272 PMID:27068538

• Media il rilascio di Zn2+ lisosomiale dopo stimolazione con specie reattive dell'ossigeno (ROS) e conferisce suscettibilità alla morte cellulare in condizioni di stress ossidativo. Riferimenti bibliografici: PMID:12594222 PMID:25562606 PMID:27068538

• Le parole chiave di UniProt includono canale del calcio, canale del sodio, trasporto ionico, fosfoproteina, legame disolfuro e elica transmembrana, che riflettono la struttura e la regolazione del canale.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 1204–1503) che include il dominio Nudix fondamentale per il legame dell'ADP-ribosio; questo anticorpo policlonale può riconoscere epitopi conservati tra le isoforme 1–3.
• Per il western blotting, il peso molecolare previsto è di ~171 kDa; si consiglia l'utilizzo di gel SDS-PAGE a bassa percentuale e tempi di trasferimento estesi per una rilevazione efficiente di questa proteina di membrana di grandi dimensioni.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P), aspettarsi pattern di colorazione della membrana cellulare, delle vescicole citoplasmatiche e degli organelli; eseguire la validazione con controlli appropriati nella linea cellulare di interesse.
• Per l'utilizzo in ELISA, i protocolli indiretti standard devono essere ottimizzati; l'anticorpo reagisce in modo crociato con TRPM2 di topo e ratto, permettendo progetti sperimentali su più specie.

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