Anticorpo policlonale coniglio anti-TRPM8 per WB, ELISA - Q7Z2W7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della TRPM8

• TRPM8 è un canale cationico non selettivo permeabile ai cationi monovalenti e bivalenti, con una permeabilità maggiore per il Ca(2+). Viene attivato da temperature fredde (<23-28°C) e da ligandi chimici come il mentolo e l'icilina, e funge da sensore primario del freddo nei neuroni sensoriali periferici. Riferimenti correlati: PMID:15306801, PMID:15852009, PMID:16174775
• Il canale presenta un'attivazione dipendente dal potenziale; il raffreddamento o gli agonisti chimici spostano la soglia di attivazione verso potenziali di membrana fisiologici, consentendo la depolarizzazione dipendente dalla temperatura. Riferimenti correlati: PMID:15306801
• Al di là della termosensazione, TRPM8 regola la secrezione basale di lacrime rilevando il raffreddamento indotto dall'evaporazione e i cambiamenti di osmolalità sulla superficie corneale.
• Nel cancro della prostata, TRPM8 può contribuire alla migrazione e all'invasione cellulare, e la sua espressione è elevata nei tumori prostatici e in altre neoplasie, inclusi i tumori del colon, polmone, seno e pelle. Riferimenti correlati: PMID:16174775, PMID:25559186
• TRPM8 si localizza sulla membrana plasmatica, nelle membrane raft e sulla membrana del reticolo endoplasmatico, in linea con il suo ruolo nella segnalazione sensoriale rapida e nella regolazione del calcio intracellulare.
• La proteina è un membro della famiglia dei canali del recettore potenziale transienti (TRP) e contiene sei domini transmembrana, regioni a coil avvolto e un dominio TRP, caratteristico dei membri della sottofamiglia TRPM.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione, e l'attività del canale può essere modulata da splicing alternativo che produce isoforme con proprietà regolatorie distinte.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende l'estremità C citosolica (aa 980-1104), una regione probabilmente accessibile nel Western blot denaturante; è attesa una banda intorno ai 128 kDa in base al peso molecolare teorico.
• Per il Western blot, utilizzare SDS-PAGE standard e trasferire su PVDF o nitrocellulosa; ottimizzare le condizioni di bloccaggio e rilevamento per questa proteina di membrana di dimensioni moderatamente grandi.
• Nelle applicazioni ELISA è possibile utilizzare un rivestimento antigenico diretto o indiretto; titrare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il formato di saggio utilizzato.
• Validare la specificità dell'anticorpo in linee cellulari o tessuti umani noti per esprimere TRPM8, come le linee di cancro della prostata (ad esempio LNCaP) o modelli di neuroni sensoriali.

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