Anticorpo policlonale coniglio anti-TSC2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49815

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del TSC2

• La Tuberina (TSC2) è il prodotto proteico del gene TSC2, un soppressore tumorale che forma un complesso con TSC1 (amartina) per costituire il complesso TSC-TBC.
• Il TSC2 funziona come proteina attivatrice delle GTPasi (GAP) per la piccola GTPasi RHEB, un attivatore diretto dell'attività chinasi mTORC1 (PubMed:12172553, PubMed:12820960, PubMed:12842888). Riferimenti correlati: PMID:12172553, PMID:12820960, PMID:12842888
• In condizioni di privazione di nutrienti, il complesso TSC-TBC inibisce mTORC1, impedendo la fosforilazione degli effettori a valle come la chinasi S6 della proteina ribosomiale e 4E-BP1 (PubMed:12172553, PubMed:12271141, PubMed:12842888). Riferimenti correlati: PMID:12172553, PMID:12271141, PMID:12842888
• In risposta ai fattori di crescita e agli amminoacidi, il complesso TSC-TBC viene inattivato, alleviando l'inibizione di mTORC1 e promuovendo la crescita cellulare anabolica (PubMed:12172553, PubMed:24529379). Riferimenti correlati: PMID:12172553, PMID:24529379
• Il TSC2 si localizza sulle membrane lisosomiali e nel citosol, dove regola la segnalazione RHEB e mTORC1.
• Il TSC2 è ampiamente espresso nei tessuti inclusi fegato, cervello, cuore, rene e muscolo scheletrico, coerente con il suo ruolo fondamentale nella percezione dei nutrienti e nel controllo della crescita.
• Le mutazioni nel TSC2 causano la sclerosi tuberosa, caratterizzata da tumori benigni multiorgano e manifestazioni neurologiche come l'epilessia.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali come la fosforilazione e l'ubiquitinazione, che modulano la sua attività e stabilità.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il western blotting, il TSC2 è una proteina grande (~201 kDa); considerare l'uso di un gel di poliacrilamide a bassa percentuale (es. 6–8%) e tempi di trasferimento più lunghi per garantire un trasferimento efficiente sulla membrana.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare il recupero dell'antigene e validare la colorazione in tessuti con nota alta espressione di TSC2, come il rene o il cervello.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), confermare la localizzazione subcellulare del TSC2 (citoplasmatica/lisosomiale) nelle linee cellulari di interesse.
• Quando si utilizza questo anticorpo policlonale per ELISA, accoppiarlo con un anticorpo di rilevamento adatto e validare contro il TSC2 ricombinante o lisati cellulari.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata per esperimenti critici; considerare l'esecuzione di una curva standard con controlli positivi e negativi noti.

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