Anticorpo policlonale coniglio Anti-TTC3 per WB, ELISA - P53804

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TTC3

• TTC3 è un'E3 ubiquitina-proteina ligasi che catalizza specificamente la formazione di catene di poliubiquitina legate alla Lisina 48, indirizzando i substrati alla degradazione proteasomica. Riferimenti correlati: PMID:20059950, PMID:30696809
• Media l'ubiquitinazione e la degradazione di Akt fosforilato (AKT1, AKT2, AKT3) nel nucleo, fungendo da regolatore terminale della segnalazione di Akt; la sua stessa fosforilazione da parte di Akt è un prerequisito per l'attività ligasica. Riferimenti correlati: PMID:20059950
• Regola positivamente la transizione epiteliale-mesenchimale indotta da TGFB1 e la differenziazione in miofibroblasti ubiquitinando e degradando SMURF2. Riferimenti correlati: PMID:30696809
• Regola la differenziazione neuronale modulando il rimodellamento dell'actina e l'organizzazione del Golfo tramite la cascata di segnalazione RHOA-CIT-ROCK. Riferimenti correlati: PMID:17488780, PMID:24695496
• Inibisce la proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:30203323
• Si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nell'apparato del Golgi.
• È espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti esaminati.
• Presenta ripetizioni TPR e un dominio anello RING; è classificato tra le transferasi e nella via di coniugazione dell'ubiquitina, subisce splicing alternativo e fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1400–1700, una regione senza domini transmembrana predetti, adatta per rilevare sia l'isoforma a lunghezza intera che quella troncata nel western blotting.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è ~230 kDa; si consiglia di utilizzare un gel di SDS-PAGE a bassa percentuale e condizioni di trasferimento umido ottimizzate per proteine ad alto peso molecolare.
• L'espressione di TTC3 è ubiquitaria ma può variare tra le linee cellulari; includere controlli positivi appropriati (ad esempio HeLa, HEK293) e convalidare nel proprio sistema modello.
• Quando si analizzano le vie di degradazione dipendenti dall'ubiquitinazione, il trattamento con inibitori del proteasoma (ad esempio MG132) può stabilizzare il bersaglio e migliorare la rilevazione.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può fornire un segnale robusto, ma è sempre necessario titolare l'anticorpo e confermare la specificità con un antigene ricombinante o blocco peptide.

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