Anticorpo policlonale Anti-TTK per WB, IF/ICC, ELISA - P33981

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TTK

• La protein chinasi a doppia specificità TTK (conosciuta anche come MPS1) è una serina/treonina e tirosina chinasi che svolge un ruolo fondamentale nel punto di controllo dell'assemblaggio del fuso mitotico, ritardando l'anafase finché tutti i cromosomi non sono correttamente biorientati, e nella correzione degli attaccamenti errani tra cinetocori e microtubuli.
  Riferimenti correlati: PMID:18243099, PMID:28441529, PMID:29162720
• TTK fosforila MAD1L1 per promuovere il punto di controllo dell'assemblaggio del fuso mitotico.
  Riferimenti correlati: PMID:18243099, PMID:29162720
• Fosforila CDCA8/Borealin, aumentando l'attività della chinasi Aurora B (AURKB) a livello del cinetocore.
  Riferimenti correlati: PMID:18243099
• La fosforilazione di SKA3 al residuo Ser-34 da parte di TTK innesca la dissociazione del complesso SKA dai microtubuli, destabilizzando gli attaccamenti tra microtubuli e cinetocori.
  Riferimenti correlati: PMID:28441529
• TTK fosforila KNL1, KNTC1 e subisce anche autofosforilazione, contribuendo alla segnalazione del punto di controllo.
  Riferimenti correlati: PMID:28441529
• Fosforila MCRS1, aumentando il reclutamento di KIF2A alle estremità negative dei microtubuli del fuso, che promuove l'allineamento cromosomico.
  Riferimenti correlati: PMID:30785839
• La proteina è presente nelle linee cellulari a proliferazione rapida, in linea con le sue funzioni mitotiche.
• TTK contiene un dominio chinasi legante l'ATP, subisce acetilazione e splicing alternativo, ed è catalogato come fosfoproteina del proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blotting, l'immunogeno bersaglia la regione C-terminale (aa 536-789) di TTK umano. Il peso molecolare previsto è ~97 kDa; verificare la migrazione della banda nei lisati e nelle condizioni specifiche del tuo esperimento.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, TTK si localizza ai cinetocori durante la mitosi. Utilizzare protocolli di permeabilizzazione e fissazione appropriati per ottenere una colorazione ottimale dei cinetocori. Convalidare in popolazioni di cellule mitotiche (ad esempio, cellule trattate con nocodazolo).
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo sia come reagente di cattura che di rilevazione per determinare le concentrazioni di lavoro adatte. Includere controlli positivi e negativi.
• L'anticorpo ha reattività crociata con TTK di uomo, topo e ratto, ma l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno suggerisce una possibile reattività con altre specie; si raccomanda la convalida nella specie bersaglio.
• Per studi funzionali sull'attività chinasi di TTK, si consiglia di utilizzare un controllo di caricamento appropriato e anticorpi fosfo-specifici.

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