Anticorpo policlonale anti-TUBB8 per WB, IF/ICC, ELISA - Q3ZCM7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TUBB8

• TUBB8 codifica la catena beta-8 della tubulina, che è un componente principale dei microtubuli. I microtubuli sono polimeri cilindrici composti da eterodimeri di alfa- e beta-tubulina che si assemblano in protofilamenti lineari.
• TUBB8 svolge un ruolo fondamentale nell'assemblaggio del fuso meiotico ed è essenziale per la corretta segregazione dei cromosomi durante la maturazione degli ovociti. Riferimenti correlati: PMID:26789871, PMID:34509376
• TUBB8 è espresso prevalentemente negli ovociti in diverse fasi dello sviluppo, evidenziando la sua funzione specializzata nella meiosi femminile.
• A livello subcellulare, TUBB8 si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro e, in particolare, nel fuso meiotico, in accordo con il suo ruolo nella dinamica dei microtubuli.
• Come le altre beta-tubuline, TUBB8 lega il GTP e la sua attività GTPasica è essenziale per l'instabilità dinamica dei microtubuli; la subunità alfa idrolizza il GTP, mentre la subunità beta si trova nella forma legata al GTP all'estremità positiva in crescita del microtubulo.
• TUBB8 è una fosfoproteina e contiene legami isopeptidici, con potenziali modifiche post-traduzionali che ne regolano la funzione.
• Le mutazioni di TUBB8 sono associate a difetti nella maturazione degli ovociti e all'infertilità femminile, sottolineandone l'importanza clinica nella medicina riproduttiva.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per produrre questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 344-444 di TUBB8 umano. Questa regione si trova nel dominio C-terminale, che può influenzare la specificità tra le diverse isoforme della beta-tubulina; se utilizzato in sistemi diversi dagli ovociti, si raccomanda di testare la reattività crociata con altre tubuline.
• Per il western blotting (WB) di campioni umani, si prevede che TUBB8 migri a un peso molecolare apparente di circa 50 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati, come lisati di ovociti umani o di tessuto ovarico.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), si prevede che la colorazione di TUBB8 si localizzi nel fuso meiotico degli ovociti; le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate per preservare le strutture dei microtubuli.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per la quantificazione basata su peptidi; assicurarsi che l'antigene di rivestimento corrisponda alla regione dell'immunogeno.
• Poiché l'espressione di TUBB8 è altamente ristretta agli ovociti, altre linee cellulari possono mostrare un'espressione endogena bassa o assente; per gli studi funzionali si possono prendere in considerazione modelli a espressione forzata o cellule germinali differenziate in vitro.

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