Anticorpo policlonale coniglio anti-TUFM per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P49411

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TUFM

• TUFM codifica per il fattore di allungamento mitocondriale Tu (EF-TuMT), noto anche come P43, essenziale per la biosintesi proteica mitocondriale.
• Come idrolasi del GTP, EF-TuMT promuove il legame dipendente da GTP dell'aminoacil-tRNA al sito A dei ribosomi durante la traduzione mitocondriale, un processo conservato tra le specie.
• Oltre alla traduzione, TUFM svolge un ruolo nella regolazione dell'autofagia e dell'immunità innata reclutando ATG5-ATG12 e NLRX1 a livello mitocondriale, fungendo così da punto di controllo per la via RIGI-MAVS. Riferimenti correlati: PMID:28407488
• TUFM inibisce le risposte all'interferone di tipo I mediate da RLR promuovendo al contempo l'autofagia, collegando la sintesi proteica mitocondriale alla segnalazione immunitaria innata antivirale. Riferimenti correlati: PMID:22749352
• A livello subcellulare, TUFM è localizzato nella matrice mitocondriale, coerente con la sua funzione primaria nella traduzione organellare.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione e la fosforilazione, identificate negli studi di proteomica, che potrebbero regolare la sua attività o le sue interazioni.
• Le mutazioni in TUFM sono associate alla malattia mitocondriale primaria, sottolineando la sua rilevanza clinica nella disfunzione mitocondriale.
• TUFM è anche implicato nelle interazioni ospite-virus, come indicato dalle annotazioni delle parole chiave funzionali, sebbene i meccanismi dettagliati rimangano da chiarire completamente.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 186-455) di TUFM umano; è prevista una reattività crociata con topo e ratto a causa dell'alta conservazione della sequenza, ma si consiglia la validazione dell'allineamento della sequenza per altre specie.
• Per WB, si prevede una banda vicino a 50 kDa nei lisati arricchiti di mitocondri; considerare l'uso di controlli appropriati di frazionamento subcellulare.
• In IHC-P e IF/ICC, dovrebbe essere osservato un pattern di colorazione citoplasmatica punteggiata tipico delle proteine mitocondriali; includere la colorazione simultanea con marcatori mitocondriali per la conferma.
• La natura policlonale di questo anticorpo può fornire un segnale robusto per le applicazioni IP ed ELISA; si consiglia l'ottimizzazione della concentrazione dell'anticorpo e delle condizioni di incubazione.
• Poiché TUFM partecipa alla regolazione dell'autofagia, i trattamenti con induttori o inibitori dell'autofagia possono modulare la sua espressione o localizzazione; considerare questo nella progettazione di saggi funzionali.
• La specificità dell'anticorpo è meglio validata utilizzando linee cellulari con knockout o knockdown di TUFM, o tramite saggi di competizione peptidica.

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