Anticorpo policlonale coniglio anti-Tirosina Idrossilasi per WB, IF/ICC, ELISA - P07101

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Tirosina Idrossilasi (TH)

• La tirosina idrossilasi (TH) catalizza la fase limitante della velocità nella biosintesi delle catecolamine: la conversione della L-tirosina in L-Dopa, precursore di dopamina, noradrenalina e adrenalina. Questa reazione utilizza tetraidrobiopterina e ossigeno molecolare; può anche idrossilare fenilalanina e triptofano con minore specificità. Riferimenti correlati: PMID:15287903, PMID:1680128, PMID:17391063, PMID:24753243, PMID:34922205, PMID:8528210
• La TH appartiene alla famiglia delle aromatico amminoacido idrossilasi dipendenti da biopterina e richiede ferro come cofattore.
• Lo splicing alternativo produce più isoforme; alcune isoforme non possiedono attività catalitica.
• È espressa principalmente nel cervello e nelle ghiandole surrenali, coerentemente con il suo ruolo nella sintesi di neurotrasmettitori.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma (regione perinucleare), il nucleo, i terminali assonici e le vescicole sinaptiche.
• La fosforilazione regola l'attività della TH; la proteina è identificata come fosfoproteina negli studi di proteomica.
• Le mutazioni associate a malattie nella TH sono collegate alla distonia DYT5b, al morbo di Parkinson e al parkinsonismo.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per Western blot (WB), è possibile rilevare una banda prevista intorno a 59 kDa; confermare utilizzando un lisato di controllo positivo da tessuto cerebrale o surrenale. Le dimensioni specifiche delle isoforme possono variare.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), può essere necessaria la permeabilizzazione per accedere alle pool citoplasmatiche e nucleari di TH. Validare la colorazione nelle linee cellulari pertinenti (ad esempio, neuroblastoma SH-SY5Y) o nei neuroni primari.
• Poiché l'immunogeno è un peptide sintetico, il blocco con il peptide di immunizzazione aiuta a confermare la specificità dell'anticorpo.
• Per ELISA, ottimizzare empiricamente le condizioni di rivestimento e rilevamento. L'anticorpo rileva la TH di uomo, topo e ratto, consentendo lo sviluppo di saggi cross-specie.
• La reattività crociata con topo e ratto è stata validata; è comunque necessario includere controlli appropriati per nuovi sistemi modello.

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