Anticorpo policlonale di coniglio Anti-U1A/SNRPA per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09012

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di U1A/SNRPA

• U1A (U1 small nuclear ribonucleoproteina A) è un componente dell'snRNP U1, che svolge un ruolo fondamentale nel riconoscimento del sito di splicing 5' del pre-mRNA e nelle fasi iniziali dell'assemblaggio dello spliceosoma. L'snRNP U1 è il primo a legarsi al pre-mRNA, facilitando il legame successivo di U2 e del tri-snRNP U4/U6/U5.
• SNRPA lega specificamente l'ansa stem-loop II dell'snRNA U1, contribuendo alla stabilizzazione del complesso U1 snRNP–pre-mRNA e alla definizione accurata del sito di splicing 5'.
• In forma priva di snRNP (SF-A), U1A può partecipare all'accoppiamento tra splicing e poliadenilazione del pre-mRNA, e mostra una preferenza di legame per il motivo 5'-UGCAC-3' sugli RNA.
• La proteina è localizzata esclusivamente nel nucleo, in linea con il suo ruolo nella processazione del pre-mRNA.
• U1A subisce diverse modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e metilazione, che possono regolare la sua attività e le sue interazioni.
• Il peso molecolare dell'isoforma canonica è di circa 31,3 kDa e appartiene alla famiglia delle ribonucleoproteine con motivi caratteristici di riconoscimento dell'RNA (RRM).
• I processi biologici chiave associati a U1A/SNRPA includono l splicing, la processazione e l'assemblaggio dello spliceosoma dell'mRNA, ed è un componente del complesso snRNP U1.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting è attesa una banda a circa 31 kDa corrispondente a U1A/SNRPA. Convalidare la rilevazione utilizzando estratti nucleari o lisati cellulari totali pertinenti di campioni umani, di mouse o di ratto.
• Nell'immunistochimica (IHC-P) possono essere necessari metodi di recupero dell'antigene; ottimizzare i protocolli a base di citrato o EDTA e includere controlli appropriati per la colorazione nucleare.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), assicurare una permeabilizzazione nucleare efficiente (ad esempio, trattamento con Triton X-100) e considerare la co-colorazione con un marcatore dello spliceosoma o DAPI per confermare la localizzazione nucleare.
• Questo anticorpo è adatto per ELISA; può essere utilizzato per rilevare U1A/SNRPA ricombinante o nativo. Si raccomanda di ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo.
• L'immunogeno copre la proteina full-length (aa 1–282), quindi è probabile che l'anticorpo riconosca sia la forma nativa che quella denaturata, ma la reattività crociata con altri componenti dell'snRNP U1 deve essere esclusa mediante controlli appropriati.

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