Anticorpo policlonale di coniglio anti-U2AF1 per WB, IHC-P, IP, ELISA - Q01081

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di U2AF1 (subunità da 35 kDa del fattore di splicing U2AF)

• U2AF1 codifica la piccola subunità da 35 kDa del fattore ausiliario U2 (U2AF), un fattore di splicing eterodimerico essenziale per il riconoscimento del sito di splicing 3' e il reclutamento dello snRNP U2.
• Sia nello splicing costitutivo sia in quello dipendente da enhancer, U2AF1 media interazioni critiche proteina-proteina e proteina-RNA, fungendo da ponte tra la grande subunità U2AF2 e i complessi legati agli enhancer.
• La proteina U2AF1 contiene due domini conservati a dita di zinco che facilitano il legame all'RNA e l'assemblaggio dello spliceosoma.
• U2AF1 si localizza nel nucleo ed è arricchita negli speckle nucleari, domini subnucleari in cui si concentrano i fattori dello splicing del pre-mRNA.
• Le modifiche post-traduzionali di U2AF1 includono fosforilazione, acetilazione e metilazione, che possono regolarne l'attività e le interazioni durante lo splicing.
• Lo splicing alternativo di U2AF1 genera molteplici isoforme, contribuendo potenzialmente alla regolazione dello splicing specifica per tessuto o dipendente dal contesto.
• Le mutazioni in U2AF1 sono associate a varianti patologiche, sottolineandone l'importanza nel mantenimento di un'elaborazione accurata del pre-mRNA.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno di questo anticorpo è un peptide sintetico che comprende la regione N-terminale (amminoacidi 1-100), pertanto è probabile che rilevi più isoforme di U2AF1 se l'epitopo è conservato.
• Il peso molecolare previsto della proteina è di circa 28 kDa; durante l'esecuzione del Western blot, si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE al 10-15% per una separazione ottimale.
• Sebbene sia stato convalidato per WB, IHC-P, IP ed ELISA, le diluizioni di lavoro e le condizioni ottimali devono essere determinate empiricamente in ciascun sistema sperimentale.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto suggerisce che l'epitopo sia conservato, ma si raccomanda una convalida indipendente in queste specie.

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