Anticorpo policlonale anti-U2AF2/U2AF65 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P26368

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di U2AF2/U2AF65

• U2AF2/U2AF65 è un fattore di splicing essenziale per lo splicing del pre-mRNA e l'elaborazione dell'estremità 3', poiché si lega al tratto polipirimidinico vicino al sito di splicing 3'. Riferimenti correlati: PMID:17024186
• Può accoppiare la trascrizione allo splicing reclutando il complesso PRP19 al dominio C-terminale della RNA polimerasi II. Riferimenti correlati: PMID:21536736
• La proteina è localizzata nel nucleo, in accordo con il suo ruolo nell'elaborazione dell'mRNA.
• U2AF2 regola gli eventi di splicing alternativo, come l'induzione dell'inclusione dell'esone della troponina cardiaca T (TNNT2) e la repressione dello splicing dell'esone 10 di MAPT/Tau.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che possono modulare la sua attività (parole chiave UniProt P26368).
• È necessario per l'esportazione dell'mRNA dal nucleo, anche per i trascritti privi di introni.
• La scheda UniProt elenca ulteriori caratteristiche, come lo splicing alternativo, le varianti associate a malattie con disabilità intellettiva e la formazione di legami isopeptidici, evidenziandone la complessità funzionale.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 192-471 di U2AF2 umano. Questa regione può includere domini funzionali chiave; si consiglia di verificare la copertura della sequenza in base alle esigenze specifiche dell'isoforma.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 54 kDa; validare utilizzando lisati di controllo positivo appropriati provenienti da cellule o tessuti umani o murini.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), è prevista una colorazione nucleare; utilizzare protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione per preservare gli antigeni nucleari.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), la natura policlonale può aumentare l'efficienza di cattura, ma è necessario confermare la compatibilità con i test a valle, come il Western blot e la spettrometria di massa.
• L'idoneità per ELISA suggerisce che l'anticorpo può legarsi alla proteina nativa o denaturata; ottimizzare le condizioni di rivestimento e le diluizioni dell'anticorpo per i test quantitativi.
• La reattività crociata con il topo ne consente l'applicazione nei modelli murini, ma è sempre necessario validare la reattività specie-specifica nel sistema sperimentale.

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