Anticorpo policlonale di coniglio anti-UBA5 per WB, IHC-P, ELISA - Q9GZZ9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di UBA5

• UBA5 è l'enzima simile a E1 che catalizza la fase iniziale dell'attivazione di UFM1 nella via di ufmilazione, un sistema di modificazione simile all'ubiquitinazione. Riferimenti correlati: PMID:15071506, PMID:18442052, PMID:20368332

• L'enzima attiva UFM1 adenilando la glicina C-terminale con ATP, seguito dalla formazione di un legame tioestere tra UFM1 e la cisteina catalitica di UBA5, con rilascio di AMP. Riferimenti correlati: PMID:20368332, PMID:26929408, PMID:27653677

• L'attivazione di UFM1 avviene attraverso un meccanismo di legame trans, in cui UFM1 interagisce con entrambe le subunità dell'omodimero UBA5, aumentando il legame all'ATP e la stabilità dell'omodimero. Riferimenti correlati: PMID:27653677, PMID:29295865

• UBA5 trasferisce quindi UFM1 attivato all'enzima simile a E2 UFC1 attraverso un altro meccanismo trans. Riferimenti correlati: PMID:27653677, PMID:34588452

• L'ufmilazione, mediata da UBA5, è coinvolta in diversi processi cellulari, tra cui il riciclo dei ribosomi, la risposta al danno del DNA, la segnalazione dell'interferone e la reticolofagia (ER-fagia). Riferimenti correlati: PMID:30412706, PMID:32160526, PMID:35394863

• L'ufmilazione è essenziale per la differenziazione eritroide dei megacariociti e degli eritrociti.

• UBA5 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana del reticolo endoplasmatico e nell'apparato di Golgi.

• È ampiamente espresso nei tessuti e contiene un dominio di legame dello zinco; è stata identificata la fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende UBA5 umano a lunghezza intera (aa 1–404), pertanto l'anticorpo può riconoscere sia la proteina nativa sia quella denaturata. Per il Western blot, si raccomandano condizioni standard di denaturazione e riduzione.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), i metodi di recupero antigenico devono essere ottimizzati in base al tipo di tessuto; possono essere utilizzati tessuti di controllo positivo con espressione nota di UBA5, ad esempio fegato e rene.
• Le prestazioni dell'ELISA possono variare in base alle condizioni di rivestimento; eseguire una titolazione a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di anticorpo e antigene.
• Data l'elevata identità di sequenza di UBA5 tra uomo, topo e ratto, è prevista una reattività crociata, ma è necessario confermare la specificità nel proprio modello sperimentale.
• Per i saggi quantitativi, si consiglia di utilizzare una curva standard con proteina UBA5 ricombinante.

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