Anticorpo Policlonale Anti-UBE2A per WB, IHC-P, ELISA - P49459

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di UBE2A

• UBE2A funziona come un enzima E2 ubiquitina-coniugante, accettando ubiquitina dall'enzima E1 e trasferendola a una ligasi proteica E3 ubiquitina, svolgendo un ruolo centrale nella cascata di ubiquitinazione. Riferimenti correlati: PMID:16337599, PMID:20061386, PMID:23685073
• In vitro, UBE2A catalizza sia la poliubiquitinazione legata a 'Lys-11' che a 'Lys-48', indicando versatilità nella specificità del collegamento della catena. Riferimenti correlati: PMID:20061386
• Insieme alla ligasi E3 BRE1 (RNF20/RNF40), UBE2A monoubiquitina l'istone H2B alla Lys-120 (H2BK120ub1), un marcatore epigenetico critico per l'attivazione trascrizionale, l'elongazione dell'RNA polimerasi II, il silenziamento telomerico e prerequisito per la metilazione di H3K4 e H3K79. Riferimenti correlati: PMID:16337599
• UBE2A partecipa alla mitofagia agendo come enzima E2 per la ligasi E3 PRKN, implicandolo nel controllo di qualità mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:23685073
• In complesso con l'enzima E3 UBR4, UBE2A è coinvolto nel pathway della regola dell'N-terminale, dirigendo la degradazione di proteine che portano specifici residui N-terminali. Riferimenti correlati: PMID:38182926
• Attraverso l'associazione con il complesso SIFI, UBE2A inibisce la risposta allo stress mitocondriale, evidenziando un ruolo regolatorio nell'omeostasi proteica cellulare. Riferimenti correlati: PMID:38297121
• Subcellularmente, UBE2A si localizza negli endosomi tardivi e nei lisosomi, in linea con le sue funzioni nel traffico e nel ricambio proteico.
• UBE2A è soggetto a splicing alternativo e fosforilazione, ed è classificato come un regolatore della cromatina legato alla risposta al danno del DNA e alla disabilità intellettiva (MRXSN).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la proteina UBE2A umana a lunghezza intera (residui 1–152), suggerendo che l'anticorpo policlonale possa riconoscere epitopi multipli e potrebbe rilevare UBE2A endogeno in varie specie, comprese le reattività crociate confermate per umano, topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), considerare il peso molecolare previsto di 17kDa; ottimizzare le condizioni di lisi e i controlli di caricamento per convalidare la specificità della banda, specialmente data la piccola dimensione della proteina.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene e di rilevamento dovrebbero essere determinate empiricamente; includere controlli tissutali appropriati e passaggi di blocco per minimizzare il background.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può offrire alta sensibilità; si raccomandano esperimenti di titolazione e a scacchiera per stabilire i parametri ottimali di coating e rilevamento.
• Poiché UBE2A partecipa a molteplici processi cellulari (ubiquitinazione, regolazione della cromatina, mitofagia), l'anticorpo può essere utilizzato per indagare questi pathway, ma i risultati dovrebbero essere corroborati con saggi funzionali appropriati o esperimenti di knockdown/sovraespressione.

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