Anticorpo policlonale di coniglio anti-UBE2D4 per WB e ELISA - Q9Y2X8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di UBE2D4

• UBE2D4, noto anche come HBUCE1, proteina trasportatrice dell'ubiquitina D4 o ubiquitina-proteina ligasi D4, è un enzima E2 ubiquitina-coniugante codificato dal gene UBE2D4 (ID gene: 51619) nell'uomo.
• La funzione principale di UBE2D4 è di accettare l'ubiquitina dall'enzima attivatore E1 e catalizzare il suo legame covalente ai residui di lisina delle proteine bersaglio, un passaggio chiave nella cascata di ubiquitinazione.
• In vitro, UBE2D4 può promuovere la poliubiquitinazione utilizzando tutti e sette i residui di lisina interni dell'ubiquitina, con una preferenza per la formazione di catene legate a Lys-11 e Lys-48, che sono classicamente associate alla degradazione proteasomale e alla segnalazione cellulare.
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di circa 16,6 kDa (UniProt), mentre l'immunogeno ricombinante a lunghezza intera (amminoacidi 1-147) produce una banda osservata intorno ai 17 kDa nel Western blotting.
• Secondo UniProt, UBE2D4 è stata identificata in studi proteomici, che confermano la sua espressione nelle cellule umane e supportano il suo ruolo come componente del proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla sequenza codificante completa (aa 1-147) della UBE2D4 umana, quindi ci si aspetta che l'anticorpo riconosca la proteina intatta nativa; per la validazione, includere un lisato di controllo positivo noto per esprimere UBE2D4.
• Per Western blot (WB), la dimensione della banda prevista è di circa 17 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata per proteine di basso peso molecolare e confermare con marcatori di peso molecolare. L'anticorpo rileva UBE2D4 di uomo, topo e ratto, consentendo studi cross-specie.
• In ELISA, questo anticorpo policlonale può fungere da reagente di cattura o rilevamento; la diluizione ottimale deve essere determinata empiricamente mediante titolazione utilizzando UBE2D4 ricombinante o lisati cellulari.
• Come anticorpo policlonale, è possibile una variazione da lotto a lotto; eseguire sempre esperimenti di titolazione iniziali e includere controlli appropriati. Conservare a –20°C al ricevimento (spedito su sacchetti di ghiaccio) e centrifugare brevemente prima del primo utilizzo.

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