Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Ube2N/Ubc13 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61088

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Ube2N/Ubc13

• Ube2N (noto anche come Ubc13) è un enzima ubiquitina-coniugante E2 che forma eterodimeri funzionali con le subunità non catalitiche UBE2V1 o UBE2V2.
• I complessi UBE2V1–UBE2N e UBE2V2–UBE2N catalizzano specificamente l'assemblaggio di catene di poliubiquitina non canoniche legate a Lys‑63, che non indirizzano i substrati verso la degradazione proteasomiale.
• Svolge un ruolo essenziale nella tolleranza ai danni del DNA senza errori, mediando la poliubiquitinazione legata a Lys‑63 di PCNA, in cooperazione con le ligasi E3 HLTF e SHPRH.
• Nell'immunità innata antivirale, l'eterodimero UBE2N‑UBE2V1, insieme alla ligasi E3 RNF135, catalizza la poliubiquitinazione legata a Lys‑63 dipendente dall'RNA virale di RIG‑I, un passaggio critico per la produzione a valle di interferone‑beta. Riferimenti correlati: PMID:28469175, PMID:31006531
• L'enzima funziona anche nella segnalazione infiammatoria NF‑κB e MAPK; ad esempio, il dimero UBE2V1‑UBE2N agisce di concerto con TRIM5 per generare catene legate a Lys‑63 che attivano il complesso chinasi TAK1, mentre insieme a TRAF3IP2 media la poliubiquitinazione di TRAF6 a valle di IL‑17A.
• Ube2N si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, in linea con i suoi duplici ruoli nella riparazione del DNA nucleare e nella trasduzione del segnale citoplasmatica.
• Le modificazioni post‑traduzionali includono acetilazione e formazione di legami disolfuro; la proteina matura ha un peso molecolare calcolato di ~17 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide all'interno dei primi 100 amminoacidi di Ube2N umano; la sequenza dell'immunogeno è altamente conservata nel topo e nel ratto, supportando la reattività incrociata riportata.
• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda a circa 17 kDa; lisati cellulari totali da linee cellulari umane, murine o di ratto sono campioni appropriati.
• Nell'immunoistochimica (IHC‑P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; convalidare la colorazione in tessuti noti per esprimere Ube2N e utilizzare controlli appropriati.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), confermare la localizzazione nucleare e citoplasmatica; si consiglia l'ottimizzazione delle condizioni di fissazione e permeabilizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere accoppiato a un sistema di rilevamento idoneo; considerare l'uso della proteina Ube2N ricombinante o del peptide immunizzante come controllo positivo.

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