Anticorpo monoclonale Anti-Ubiquitina Coniglio per WB, IHC-P, ELISA - P0CG47

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Poliubiquitina-B

• La Poliubiquitina-B, codificata dal gene UBB, è un precursore dell'ubiquitina che produce multiple unità di ubiquitina dopo la processazione.
• L'ubiquitina esiste sia legata covalentemente a proteine bersaglio (monoubiquitina o catene di poliubiquitina) che libera (non ancorata); le catene di poliubiquitina sono legate tramite diversi residui di Lis (es. Lys-6, Lys-11, Lys-29, Lys-33, Lys-48, Lys-63) o tramite la Met iniziatrice, ciascuna con funzioni cellulari distinte.
• Le catene di poliubiquitina legate a Lys-48 indirizzano le proteine alla degradazione proteasomiale, mentre le catene legate a Lys-63 mediano segnalazioni non degradative come l'endocitosi, la risposta al danno al DNA e l'attivazione di NF-kappa-B.
• Altri tipi di legame includono: Lys-6 (riparazione del DNA), Lys-11 (ERAD e regolazione del ciclo cellulare), Lys-29 (risposta allo stress proteotossico e ciclo cellulare), Lys-33 (modificazione delle chinasi) e catene lineari (segnalazione cellulare).
• La poliubiquitina libera non ancorata funziona anche nell'attivazione delle protein chinasi e nelle vie di segnalazione.
• L'ubiquitina è localizzata prevalentemente nel citoplasma e nel nucleo, ed è presente anche sulla membrana mitocondriale esterna.
• Le modificazioni post-traduzionali dell'ubiquitina includono fosforilazione e ADP-ribosilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato utilizzando una proteina di fusione ricombinante che copre l'intera lunghezza dell'ubiquitina umana (aa 1-228), che include tutti i residui chiave per il riconoscimento delle forme monomeriche e poliubiquitinate.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è 26 kDa; tuttavia, a causa della coniugazione dell'ubiquitina a vari bersagli, si possono osservare una serie di bande a pesi molecolari più alti, che riflettono proteine poliubiquitinate.
• Quando si esegue l'immunoistochimica (IHC-P), considerare l'uso di un metodo standard di recupero dell'antigene e validare la specificità della colorazione con tessuti di controllo positivo e negativo appropriati.
• La reattività dell'anticorpo con un'ampia gamma di specie (prevista) suggerisce epitopi conservati; verificare la cross-reattività nel sistema sperimentale specifico se si utilizzano specie diverse da umano, topo o ratto.
• Per le applicazioni ELISA, l'immunogeno ricombinante può servire come controllo positivo per stabilire la sensibilità e la specificità del saggio.

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