Anticorpo policlonale di coniglio anti-UFL1 per WB, IF/ICC, ELISA - O94874

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di UFL1

• UFL1 svolge la funzione di ligasi proteica E3 che media l'ufmilazione, ovvero l'attacco covalente del modificatore UFM1, simile all'ubiquitina, ai residui di lisina delle proteine bersaglio, svolgendo ruoli chiave nel riciclo dei ribosomi, nella risposta al danno del DNA, nella segnalazione dell'interferone e nella reticulofagia (ER-fagia).
  Riferimenti correlati: PMID:20018847, PMID:20164180, PMID:20228063

• In quanto parte del complesso UREL, UFL1 catalizza la mono-ufmilazione della proteina RPL26/uL24 della subunità ribosomiale 60S, favorendo il riciclo dei ribosomi e il loro rilascio dalla membrana del reticolo endoplasmatico sia dopo la normale terminazione della traduzione sia in caso di arresto del ribosoma durante la traslocazione cotraduzionale.
  Riferimenti correlati: PMID:38383785, PMID:38383789, PMID:37036982, PMID:37595036

• UFL1 promuove la reticulofagia in risposta allo stress del reticolo endoplasmatico mediante l'ufmilazione di substrati quali CYB5R3 e RPN1, indirizzandoli alla degradazione lisosomiale; questo processo è essenziale per l'emopoiesi, la morfogenesi dei vasi sanguigni e le risposte infiammatorie.
  Riferimenti correlati: PMID:23152784, PMID:32160526, PMID:36543799, PMID:32050156

• Nella risposta al danno del DNA, UFL1 viene reclutata nei siti di rottura a doppio filamento e media la monoufmilazione dell'istone H4 nonché l'ufmilazione di MRE11, collegando la via dell'ufmilazione alla riparazione del DNA.
  Riferimenti correlati: PMID:30783677, PMID:30886146

• UFL1 agisce come regolatore negativo dell'attivazione delle cellule T mediando l'ufmilazione e la stabilizzazione del recettore del checkpoint immunitario PD-1 e ufmilando inoltre TP53/p53 per promuoverne la stabilità.
  Riferimenti correlati: PMID:38377992, PMID:32807901

• Le modifiche post-traduzionali di UFL1 includono acetilazione, metilazione e fosforilazione. UFL1 è espressa ubiquitariamente, con i livelli più elevati nel fegato, e mostra un'espressione ridotta in diversi carcinomi epatocellulari invasivi, come Hep-G2 e HLE.
  Riferimenti correlati: PMID:20018847

• UFL1 si localizza nella membrana del reticolo endoplasmatico, nel citoplasma, nel citosol, nel nucleo e nei cromosomi, in accordo con i suoi diversi ruoli nella funzione ribosomiale, nel controllo di qualità del reticolo endoplasmatico e nella riparazione del DNA.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno, costituito dagli amminoacidi 601–794 di UFL1 umano, si trova nella regione C-terminale, il che può aumentare la specificità per il bersaglio; si consiglia di verificare la reattività nella propria matrice campione includendo controlli appropriati.
• Per il Western blot (WB), si prevede una banda principale a circa 90 kDa. Ottimizzare il blocking e la diluizione dell'anticorpo utilizzando lisati di cellule umane, di topo o di ratto note per esprimere UFL1.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), UFL1 può presentare una localizzazione in più compartimenti (reticolo endoplasmatico, citoplasma, nucleo). Le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate empiricamente per preservare il riconoscimento dell'epitopo.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere impiegato come reagente di cattura o di rilevazione per UFL1 o per substrati ufmilati; convalidare la specificità e la sensibilità del test utilizzando standard pertinenti.
• In quanto anticorpo policlonale di coniglio, riconosce epitopi multipli; valutarne la possibile utilità nell'immunoprecipitazione o in altre tecniche dopo una validazione individuale.

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