Anticorpo Monoclonale Anti-UFM1 per WB, IHC-P, ELISA - P61960

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'UFM1

• UFM1 è un modificatore simile all'ubiquitina che viene legato covalentemente ai residui di lisina delle proteine bersaglio attraverso una cascata enzimatica dedicata (E1: UBA5, E2: UFC1, E3: UFL1), un processo denominato ufmilazione. Riferimenti correlati: PMID:15071506 PMID:20018847 PMID:27653677
• L'ufmilazione è coinvolta in processi cellulari essenziali tra cui il riciclo dei ribosomi, la risposta al danno al DNA, la regolazione trascrizionale e la reticulofagia (ER-phagy) innescata dallo stress del reticolo endoplasmatico. Riferimenti correlati: PMID:25219498 PMID:32160526 PMID:38383785
• Il gene UFM1 (C13orf20) genera multiple isoforme tramite splicing alternativo, con l'isoforma canonica che ha un peso molecolare di circa 9 kDa.
• UFM1 si localizza prevalentemente nel nucleo e nel citoplasma, coerentemente con i suoi ruoli nei processi nucleari e citoplasmatici.
• La proteina presenta un legame isopeptidico durante la coniugazione e fa parte della via di coniugazione simile all'ubiquitina. Le mutazioni in UFM1 sono associate alla leucodistrofia.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1-85) dell'UFM1 umano, suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce la proteina a lunghezza intera e possibilmente alcune isoforme che conservano questa regione. Per il Western blot, eseguire i campini su un gel SDS-PAGE ad alta percentuale (es. 15-20%) per trattenere la piccola proteina da 9 kDa. Considerare l'uso di membrane PVDF con basso cut-off di peso molecolare.
• Per IHC-P, i metodi standard di recupero dell'antigene come il recupero dell'epitopo indotto dal calore (HIER) in tampone citrato (pH 6.0) potrebbero essere adatti, ma si raccomanda l'ottimizzazione per ogni tipo di tessuto.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per rilevare l'UFM1 in lisati cellulari o proteine ricombinanti. Verificare la reattività incrociata nelle specie pertinenti mediante allineamento delle sequenze.
• Confermare la specificità dell'anticorpo utilizzando campioni con knockout o knockdown di UFM1, se disponibili.

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