Anticorpo policlonale anti-UFM1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61960

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'UFM1

• UFM1 (Ubiquitin-fold modifier 1) è una proteina simile all'ubiquitina da 9 kDa codificata dal gene UFM1 (precedentemente C13orf20). È nota anche come BM-002 ed è associata alla leucodistrofia (HLD14) attraverso lo splicing alternativo e varianti della malattia.
• UFM1 è legato covalentemente ai residui di lisina delle proteine substrato tramite una cascata enzimatica che coinvolge l'enzima E1 UBA5, l'enzima E2 UFC1 e la ligasi E3 UFL1, in un processo denominato ufmylation. Riferimenti correlati: PMID:15071506 PMID:20018847 PMID:27653677
• L'ufmylation partecipa al riciclaggio dei ribosomi, alla risposta al danno del DNA, alla trascrizione e alla reticulofagia (ER-phagy) innescata dallo stress del reticolo endoplasmatico. Riferimenti correlati: PMID:25219498 PMID:32160526 PMID:38383785
• A livello subcellulare, UFM1 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, coerentemente con il suo coinvolgimento nei processi nucleari e citoplasmatici.
• La proteina presenta un legame isopeptidico essenziale per la coniugazione e la sua struttura tridimensionale è stata risolta (struttura 3D). È soggetta a splicing alternativo e porta varianti della malattia legate alla leucodistrofia.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo policlonale è stato sviluppato contro la regione N-terminale (aa 1-63) dell'UFM1 umano. Data l'alta conservazione tra le specie, ci si aspetta che riconosca l'UFM1 umano, murina e del ratto come indicato.
• Per il Western blot (WB), utilizzare un controllo di carico proteico totale e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine a basso peso molecolare (~9 kDa).
• Nell'immunoprecipitazione (IP) o negli assay di ligazione di prossimità, l'anticorpo rileva l'UFM1 totale ma potrebbe non distinguere le forme libere da quelle coniugate senza ulteriore validazione.
• Per IHC-P e IF/ICC, determinare i protocolli appropriati di recupero dell'antigene e permeabilizzazione, poiché UFM1 è presente sia nel nucleo che nel citoplasma.
• Questo anticorpo è adatto per applicazioni ELISA; l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento specifico potrebbe richiedere ottimizzazione.

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