Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-ULBP1 per WB, ELISA - Q9BZM6

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'ULBP1

• ULBP1 (proteina legante UL16 1), nota anche come ALCAN-beta, ligando 1 NKG2D (N2DL-1/NKG2DL1) e trascritto precoce dell'acido retinoico 1I, è una glicoproteina di superficie cellulare appartenente alla famiglia RAET1. Condivide somiglianze strutturali con le molecole di classe I del MHC ma non presenta peptidi.
• La funzione primaria dell'ULBP1 è legare e attivare il recettore KLRK1/NKG2D sulle cellule natural killer (NK), innescando così la citotossicità mediata dalle cellule NK e il rilascio di citochine, cruciale per la sorveglianza immunitaria contro cellule infette o trasformate.
• ULBP1 è una proteina di membrana ancorata al GPI localizzata principalmente alla membrana cellulare, ma viene rilevata anche nel reticolo endoplasmatico, riflettendo il suo processing e la sua regolazione attraverso la via secretoria.
• ULBP1 è espressa in una varietà di tessuti, inclusi le cellule immunitarie (cellule T, cellule B), linee cellulari di eritroleucemia e organi come cuore, cervello, polmone, fegato, testicolo, linfonodo, timo, tonsilla e midollo osseo, nonché nei tessuti fetali (cuore, cervello, polmone, fegato), indicando ruoli sia immunitari che non immunitari.
• Come ligando indotto da stress, l'ULBP1 è upregolato in risposta a danni al DNA, infezioni virali e trasformazione cellulare, fungendo da "segnale di pericolo" per eliminare le cellule compromesse. La sua espressione può essere sfruttata dai virus (es. citomegalovirus) per evitare il rilevamento immunitario.
• Le caratteristiche chiave post-traduzionali includono un peptide segnale per la secrezione, un ancoraggio GPI per l'attacco alla membrana, glicosilazione N-legata e uno o più legami disolfuro, che stabilizzano il suo dominio extracellulare per l'interazione con NKG2D.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno consiste in una proteina di fusione ricombinante corrispondente alla regione N-terminale (aminoacidi 1–100) dell'ULBP1 umano (NP_079494.1). Questo frammento copre il peptide segnale e parte del dominio extracellulare, che potrebbe essere adatto per rilevare sia l'ULBP1 endogeno a lunghezza intera che quello ricombinante.
• Per le applicazioni di western blot (WB), considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari che esprimono ULBP1 come K562 (eritroleucemia) o Jurkat (leucemia a cellule T). Data il peso molecolare previsto di ~28 kDa (proteina core; la glicosilazione può aumentare la massa apparente), ottimizzare le condizioni riducenti e il carico proteico.
• L'anticorpo reagisce anche con l'ULBP1 del mouse, rendendolo uno strumento potenziale per studi interspecie. Tuttavia, validare la reattività nei tessuti o modelli cellulari murini rilevanti, poiché la conservazione dell'epitopo può influenzare le prestazioni.
• Nell'ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo monoclonale con un anticorpo di rilevamento policlonale per stabilire un saggio sandwich per l'ULBP1 solubile, che può essere rilasciato dalla superficie cellulare. Ottimizzare i passaggi di rivestimento e rilevamento per la sensibilità.

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