Anticorpo Policlonale Anti-ULK1/ULK2 per WB, ELISA - O75385 / Q8IYT8

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ULK1

• ULK1 è una serina/treonina chinasi essenziale per l'inizio dell'autofagia, agisce a monte del complesso PI3K per regolare la formazione dell'autofagoforo in risposta alla deprivazione di nutrienti. Riferimenti bibliografici: PMID:18936157, PMID:21460634, PMID:21795849
• Partecipa a circuiti di feedback con mTORC1 e AMPK, regolando e venendo regolato da queste vie di sensing energetico per regolare finemente l'autofagia. Riferimenti bibliografici: PMID:21795849, PMID:21460634
• ULK1 fosforila molteplici bersagli a valle, tra cui AMBRA1, ATG4B, FLCN, SESN2 e SQSTM1, per coordinare la nucleazione dell'autofagosoma, l'allungamento e il riconoscimento del carico. Riferimenti bibliografici: PMID:20921139, PMID:28821708, PMID:25126726, PMID:25040165, PMID:37306101
• Oltre all'autofagia, ULK1 svolge un ruolo nella differenziazione neuronale precoce ed è necessario per la formazione dell'assone delle cellule granulose. Riferimenti bibliografici: PMID:11146101
• ULK1 si localizza principalmente nel citoplasma e nel citosol e trasloca verso le strutture preautofagosomali dopo l'induzione dell'autofagia.
• È espresso ubiquitariamente nei tessuti adulti, con livelli rilevabili nel muscolo scheletrico, cuore, pancreas, cervello, placenta, fegato, rene e polmone.
• L'anticorpo bersaglia una regione N-terminale conservata (aa 1–283) e riconosce sia ULK1 che il suo omologo ULK2 (Q8IYT8), permettendo una rilevazione completa delle chinasi della famiglia ULK.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno include il dominio chinasi N-terminale (aa 1–283), che è fondamentale per l'attività catalitica. Questo progetto può permettere la rilevazione sia di ULK1/ULK2 totali che fosforilati, ma la specificità per lo stato di fosforilazione deve essere validata sperimentalmente.
• Per Western blot, consigliamo di utilizzare lisati di cellule intere da linee cellulari umane in condizioni di stimolazione dell'autofagia (es. deprivazione di amminoacidi o trattamento con rapamicina) per osservare cambiamenti nell'espressione proteica o shifts di mobilità.
• I protocolli ELISA possono richiedere l'ottimizzazione della concentrazione dell'antigene di coating, dei buffer di bloccaggio e della diluizione dell'anticorpo per ottenere rapporti segnale/rumore ottimali.
• Poiché la reattività crociata è riportata solo per l'uomo, validare l'anticorpo nella matrice di campione appropriata se si utilizzano campioni di origine umana nel proprio sistema di analisi.

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