Anticorpo monoclonale anti-ULK3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q6PHR2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ULK3

• ULK3 (chinasi 3 simile a Unc-51) è una protein-chinasi serina/treonina che agisce come regolatore chiave della segnalazione di smoothened nella via hedgehog e dell'inizio dell'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:19279323 PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• In presenza dei ligandi hedgehog (DHH, IHH, SHH), ULK3 si autofosforila e fosforila GLI2 (e, in misura minore, GLI1 e GLI3), favorendo la loro dissociazione da SUFU, la traslocazione nucleare e l'attivazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• In assenza del ligando hedgehog, ULK3 interagisce con SUFU, che inattiva la sua attività chinasica e impedisce la fosforilazione delle proteine GLI, garantendo la repressione della via di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:20643644

• Oltre alla segnalazione hedgehog, ULK3 induce l'autofagia in risposta alla senescenza cellulare, collegandola al controllo della qualità cellulare e all'invecchiamento. Riferimenti correlati: PMID:19279323

• ULK3 è localizzata principalmente nel citoplasma ed è ampiamente espressa nei tessuti, con i livelli più elevati nel cervello fetale e nel cervello, fegato e reni adulti; nel sistema nervoso è particolarmente abbondante nell'ippocampo.

• La proteina contiene domini chinasici e siti di legame per l'ATP e va incontro a splicing alternativo; è classificata nella famiglia delle protein-chinasi serina/treonina ed è una fosfoproteina nota.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 373–472 di ULK3 umano, una regione situata all'interno del dominio chinasico. I ricercatori possono considerare la posizione di questo epitopo nella progettazione di reagenti di rilevazione complementari.
• Questo anticorpo è stato testato in WB, IF/ICC ed ELISA. Per il western blot, la banda attesa è di circa 53 kDa; gli eventuali isoformi derivanti dallo splicing alternativo possono comparire a dimensioni diverse e devono essere validati nel sistema di campioni pertinente.
• Considerata la reattività crociata sia con campioni umani sia murini, si raccomanda un esperimento pilota con controlli positivi e negativi appropriati per confermare la specificità prima di avviare studi su larga scala.
• Per le applicazioni IF/ICC, i metodi di fissazione e permeabilizzazione cellulare devono essere ottimizzati con attenzione, poiché ULK3 è una proteina citoplasmatica.
• L'attività chinasica e l'attivazione delle vie di segnalazione possono influenzare l'espressione di ULK3; pertanto, l'utilizzo di campioni in cui la segnalazione hedgehog o l'autofagia siano modulate può contribuire a valutare le prestazioni dell'anticorpo.

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