Anticorpo policlonale anti-UNC13D per WB, ELISA - Q70J99

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di UNC13D

• UNC13D, noto anche come Munc13-4, è un membro della famiglia delle proteine Unc-13 e svolge un ruolo critico nell'esocitosi dei granuli citotossici nei linfociti.
• È richiesto sia per la maturazione dei granuli sia per l'ancoraggio/priming dei granuli alla sinapsi immunologica, regolando l'assemblaggio di strutture endosomiali riciclate e tardive che formano un compartimento esocitico endosomiale.
• La proteina regola l'esocitosi dei lisosomi secretori dipendente da Ca(2+) nei mastociti, evidenziando il suo ruolo nella degranulazione delle cellule immunitarie.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, la membrana, l'endosoma tardivo, l'endosoma riciclate e il lisosoma, riflettendo i suoi ruoli dinamici nel traffico intracellulare.
• Specificità tissutale: altamente espresso nella milza, nel timo e nei leucociti; espressione moderata nel polmone e nella placenta; bassa espressione nel cervello, nel cuore, nel muscolo scheletrico e nel rene. Trovato nei linfociti T citotossici e nei mastociti.
• Le caratteristiche chiave includono domini di legame dei metalli e del calcio, molteplici siti di fosforilazione e l'associazione con la linfoistiocitosi emofagocitica familiare (FHL).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 891-1090) di UNC13D umano, che è probabilmente ben esposta e può generare anticorpi che riconoscono la proteina nativa. Si consiglia di validare la specificità in modelli knockout o knockdown.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~123 kDa. Utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6-8%) e marcatori di peso molecolare appropriati. Testare in lisati di milza, timo o leucociti umani o murini.
• Per l'ELISA, l'immunogeno ricombinante o la proteina a lunghezza intera possono fungere da antigene di rivestimento. L'abbinamento con un anticorpo di cattura mirato a un epitope diverso può consentire lo sviluppo di un ELISA a sandwich. Ottimizzare le diluizioni e le condizioni di incubazione empiricamente.
• Essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere più epitopi; confermare i pattern delle bande e il background con controlli negativi.

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