Anticorpo monoclonale di coniglio anti-UPF1/RENT1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q92900

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di UPF1/RENT1

• UPF1 (Regolatore dei trascritti nonsense 1), noto anche come RENT1, NORF1 e hUpf1, è una RNA elicasi ATP-dipendente essenziale per la degradazione dell'mRNA mediata da codoni di terminazione prematuri (NMD), una via di sorveglianza che degrada gli mRNA aberranti contenenti codoni di stop prematuri e modula inoltre l'espressione degli mRNA normali.

• La proteina viene reclutata sui ribosomi in traduzione al momento della terminazione, dove forma il complesso transitorio SURF (SMG1-UPF1-eRF1-eRF3). Nella NMD dipendente dal complesso di giunzione esonica (EJC), questo complesso si associa al complesso di giunzione esonica tramite UPF2, formando il complesso di sorveglianza UPF1-UPF2-UPF3 che innesca la degradazione dell'mRNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:19417104
  PMID:21419344

• UPF1 è sottoposta a un ciclo critico di fosforilazione-defosforilazione. La sua fosforilazione da parte della chinasi SMG1 è un passaggio fondamentale nella NMD, mentre la defosforilazione operata da PP2A consente il riciclo dei fattori della NMD.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11544179
  PMID:25220460

• UPF1 può inoltre attivare la NMD indipendentemente da UPF2 e UPF3, indicando l'esistenza di vie alternative della NMD.
  Riferimenti correlati:
  PMID:18447585

• Oltre alla NMD, UPF1 svolge un ruolo nella degradazione dell'mRNA degli istoni dipendente dalla replicazione alla fine della fase S, una funzione indipendente da UPF2.
  Riferimenti correlati:
  PMID:16086026
  PMID:18172165

• UPF1 possiede un'attività elicasi 5'-3' ATP-dipendente su substrati RNA:DNA, RNA:RNA e DNA:DNA. Possiede inoltre un'attività ATPasica stimolata da ssDNA e si lega all'RNA; l'aggiunta di ATP riduce il legame all'RNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:10999600
  PMID:18066079
  PMID:26138914

• A livello subcellulare, UPF1 è localizzata principalmente nel citoplasma, ma anche nei P-body, nella regione perinucleare e nel nucleo.

• Tra le parole chiave associate a UPF1 figurano elicasi, legame all'ATP, dito di zinco, fosfoproteina, degradazione dell'mRNA mediata da codoni di terminazione prematuri e interazione ospite-virus.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) di UPF1 umano; questo anticorpo può riconoscere UPF1 a lunghezza intera e qualsiasi isoforma che condivida questa sequenza N-terminale.
• Il peso molecolare previsto è di 124 kDa; per il Western blot, si consiglia di utilizzare una percentuale di gel appropriata (ad esempio, SDS-PAGE all'8%) e un tempo di trasferimento sufficiente per le proteine ad alto peso molecolare.
• Questo anticorpo monoclonale di coniglio offre elevata specificità e basso background; è stato validato per WB, IF/ICC, IP ed ELISA. Per ciascuna applicazione, titolare l'anticorpo e validarlo nel sistema di campionamento pertinente.
• È riportata una reattività crociata con topo e ratto, rendendolo adatto agli studi condotti su questi organismi modello; tuttavia, i livelli di espressione endogena possono variare tra tessuti e linee cellulari.
• Per IF/ICC, includere appropriate fasi di fissazione e permeabilizzazione e utilizzare l'anticorpo a una diluizione ottimizzata per il proprio specifico contesto cellulare.

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