Anticorpo policlonale rabbit Anti-UPF2 per WB, IHC-P, IP, ELISA - Q9HAU5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della UPF2

• UPF2, nota anche come Regolatore dei trascritti senza senso 2 o omologa del soppressore di frameshift verso l'alto 2 (hUpf2), è un fattore chiave nella via di sorveglianza della degradazione nonsense-mediated dell'mRNA (NMD).
• Viene reclutata da UPF3B sul lato citoplasmatico dell'involucro nucleare al complesso di giunzione dell'esone nucleare (EJC) e forma il complesso di sorveglianza UPF1-UPF2-UPF3.
• UPF2 stimola le attività ATPasiche e di elicasi dell'RNA di UPF1, facilitando la degradazione degli mRNA che contengono codoni di stop prematuri.
• Si lega all'mRNA splicingato e svolge un ruolo fondamentale nel controllo di qualità dell'mRNA.
• UPF2 si localizza prevalentemente nel citoplasma, in particolare nella regione perinucleare, in linea con il suo ruolo nel NMD al ribosoma.
• La proteina è espressa ubiquitariamente in tutti i tessuti, a conferma del suo ruolo fondamentale nella regolazione dell'espressione genica.
• Le modifiche post-traduzionali principali includono la fosforilazione, mentre le caratteristiche strutturali comprendono domini a coil-coil e regioni ripetute per le interazioni proteina-proteina.
• Appartiene a una famiglia di proteine leganti l'RNA coinvolte nel metabolismo dell'mRNA, con possibili implicazioni nelle risposte cellulari allo stress e nelle malattie.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende una regione C-terminale (amminoacidi 1153-1272) della UPF2 umana, che è conservata nel topo, e supporta la reattività crociata riportata.
• Per il western blotting è prevista una banda vicino al peso molecolare teorico di ~148 kDa; si consiglia di utilizzare un marcatore ad alto peso molecolare e una percentuale di gel adatta per proteine di grandi dimensioni.
• Durante l'immunoprecipitazione, ottimizzare i rapporti anticorpo/lisato e tenere conto delle dimensioni di UPF2 per la rilevazione.
• Per l'immunoistochimica (sezioni incluse in paraffina), le condizioni di recupero dell'antigene potrebbero richiedere ottimizzazione a causa delle grandi dimensioni della proteina e della localizzazione associata all'involucro nucleare.
• Le prestazioni dell'ELISA possono essere valutate con frammenti di proteina UPF2 ricombinante o lisati cellulari; convalidare nel sistema di campioni pertinente.

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