Anti-USP30 coniglio anticorpo policlonale per WB, IF/ICC, ELISA - Q70CQ3

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'USP30

• USP30 (Idrolasi carbossi-terminale dell'ubiquitina 30) è un enzima deubiquitinante noto anche come enzima deubiquitinante 30, tioesterasi dell'ubiquitina 30 e proteasi di elaborazione specifica dell'ubiquitina 30, codificato dal gene USP30.
• Ancorato alla membrana esterna mitocondriale, l'USP30 agisce come un inibitore chiave della mitofagia contrastando l'azione della parkina (PRKN); idrolizza l'ubiquitina allegata dalla parkina sulle proteine bersaglio come RHOT1/MIRO1 e TOMM20, bloccando così la capacità della parkina di guidare la mitofagia. Riferimenti correlati: PMID:18287522 PMID:24896179 PMID:25527291
• Cliva preferenzialmente le catene poliubiquitinate legate a 'Lys-6' e 'Lys-11', due tipi di legame coinvolti nella segnalazione mitofagica; non cliva in modo efficiente la poliubiquitina fosforilata a 'Ser-65'. Riferimenti correlati: PMID:25621951 PMID:25527291
• Regola negativamente la fusione mitocondriale mediando la deubiquitinazione di MFN1 e MFN2.
• Localizzazione subcellulare: membrana esterna del mitocondrio; contiene un'elica transmembrana.
• Specificità tissutale: espresso nel muscolo scheletrico, pancreas, fegato e rene.
• Appartiene alla famiglia delle peptidasi C19; classificato come proteasi tiolica e idrolasi coinvolta nella via di coniugazione dell'ubiquitina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 57-390 dell'USP30 umano, coprendo il dominio catalitico; considerare la conservazione di questa regione quando si valuta la reattività nel topo e nel ratto.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 59 kDa; validare la dimensione della banda rilevata nel proprio specifico sistema di campione, poiché le modificazioni post-traduzionali possono alterare la migrazione.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, si deve prevedere una colorazione della membrana esterna mitocondriale; si consiglia una controcolorazione con un marcatore mitocondriale per confermare la localizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e le diluizioni degli anticorpi utilizzando uno standard di proteina USP30 ricombinante, se disponibile.
• Quando si studia la regolazione della mitofagia, considerare la manipolazione farmacologica o genetica concomitante della parkina per valutare l'attività deubiquitinasi dell'USP30 nel proprio modello.

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