Anticorpo policlonale coniglio anti-USP5 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45974

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di USP5

• USP5 (Ubiquitin carbossil-terminale idrolasi 5), nota anche come Isopeptidasi T, è un enzima deubiquitinante che scinde i legami isopeptidici tra l'ubiquitina e le proteine bersaglio, regolando vie di segnalazione chiave come NF-kappa-B, Wnt/beta-catenina e la produzione di citochine.
• Promuove la segnalazione Wnt tramite deubiquitinazione e stabilizzazione di FOXM1, che a sua volta facilita il reclutamento della beta-catenina sui promotori dei geni bersaglio di Wnt. Riferimenti correlati: PMID:26912724
• USP5 regola l'assemblaggio e il disassemblaggio dei granuli di stress indotti dal calore mediando l'idrolisi delle catene di ubiquitina non ancorate. Riferimenti correlati: PMID:29567855
• Nell'immunità innata, stabilizza TXNIP per promuovere l'apoptosi e la risposta infiammatoria indotta dal lipopolisaccaride. Riferimenti correlati: PMID:37534934
• USP5 agisce come regolatore negativo dell'autofagia modulando ULK1 sia a livello proteico che di mRNA. Riferimenti correlati: PMID:37607937
• Regola negativamente la produzione di interferone di tipo I rimuovendo le catene di poliubiquitina legate a Lys-48 e Lys-63 da IRF3. Riferimenti correlati: PMID:39761299
• USP5 influenza la riparazione del disallineamento del DNA stabilizzando MLH1, contrastando l'ubiquitina ligasi UBR4. Riferimenti correlati: PMID:39032648
• Dopo stimolazione con insulina, la fosforilazione di USP5 mediata da mTORC1 aumenta la stabilità di YTHDF1 rimuovendo la poliubiquitinazione legata a Lys-11. Riferimenti correlati: PMID:39900921
• Subcellularmente, USP5 è prevalentemente citoplasmatica ma si trova anche nei granuli di stress e nel nucleo, a conferma dei suoi diversi ruoli funzionali.
• Appartiene alla famiglia delle peptidasi C19 e contiene domini a dita di zinco, indicativi della sua attività catalitica dipendente da metalli.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende i residui 1–280 della USP5 umana, localizzati all'estremità N-terminale; questo può favorire la rilevazione di isoforme full-length e N-terminal in condizioni denaturanti e native.
• Per il Western blotting, è prevista una banda vicino a 96 kDa; si consiglia di includere controlli positivi e negativi per confermare la specificità su lisati di origine umana, murine o ratto.
• In IHC-P, le condizioni di recupero dell'antigene devono essere ottimizzate per il tessuto specifico; titolare la concentrazione dell'anticorpo per ridurre il fondo.
• Per IF/ICC, la co-colorazione con marcatori di granuli di stress o marcatori nucleari può aiutare a convalidare le variazioni di localizzazione di USP5 in condizioni di stress o perturbazioni della segnalazione.
• Negli saggi ELISA, se si intendono condurre studi funzionali, utilizzare substrati peptidici o proteici ricombinanti progettati con cura per testare l'attività deubiquitinasi.
• Data la reattività multi-specie, questo anticorpo può essere uno strumento utile per trasferire i risultati da modelli roditori a sistemi umani.

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