Anticorpo policlonale coniglio anti-VAPB per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95292

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della VAPB

• VAPB (Proteina associata alla proteina associata alla membrana delle vescicole B/C, alias ALS8, VAP-B, VAMP-B) è una proteina di membrana ancorata al reticolo endoplasmatico codificata dal gene VAPB nell'uomo.
• Media i siti di contatto tra il RE e gli endosomi tramite interazione con proteine contenenti il motivo FFAT come STARD3 e WDR44. Riferimenti correlati: PMID:32344433, PMID:33124732
• L'interazione con STARD3 richiede la fosforilazione del suo motivo FFAT. Riferimenti correlati: PMID:33124732
• Partecipa all'esportazione di proteine neosintetizzate dal RE attraverso l'interazione con WDR44. Riferimenti correlati: PMID:32344433
• Induce l'attività di ERN1/IRE1 come parte della risposta alla proteina mal ripiegata (UPR). Riferimenti correlati: PMID:16891305, PMID:20940299
• Regola l'omeostasi cellulare del calcio. Riferimenti correlati: PMID:22131369
• Localizzato subcellularmente alla membrana del reticolo endoplasmatico.
• Espresso ubiquitariamente con predominanza dell'isoforma 1. Soggetto ad acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione; collegato alla sclerosi laterale amiotrofica e alle interazioni ospite-virus.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno ricombinante corrisponde agli amminoacidi 10–222, coprendo la regione citoplasmatica della VAPB; questo design può rilevare sia la forma a lunghezza intera che potenziali frammenti N-terminali.
• Per il Western blot, la dimensione della banda prevista è di ~27 kDa; una SDS-PAGE riducente e i protocolli di trasferimento standard sono generalmente adatti.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e di permeabilizzazione per il rilevamento delle proteine di membrana del RE.
• Verificare la specificità dell'anticorpo confrontando i pattern di colorazione con la localizzazione subcellulare nota della VAPB o utilizzando controlli knockout/knockdown.
• Per ELISA, abbinare a una coppia di anticorpi di cattura/rilevamento convalidata o utilizzare come reagente di rilevamento dopo aver confermato la reattività contro la VAPB nativa o ricombinante.

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