Anticorpo Monoclonale Anti-VCAM-1/CD106 per FC - P29533

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di VCAM-1/CD106

• VCAM-1 (Vascular Cell Adhesion Molecule 1), noto anche come CD106, è una glicoproteina di adesione cellulare codificata dal gene Vcam1. È espressa principalmente sulla superficie delle cellule endoteliali e svolge un ruolo critico nella sorveglianza immunitaria e nell'infiammazione.
• Come regolatore principale dell'adesione dei leucociti all'endotelio, VCAM-1 media l'adesione stabile di linfociti, monociti, eosinofili e basofili all'endotelio vascolare tramite interazione con le integrine (ad esempio VLA-4/α4β1).
• Durante le risposte infiammatorie, il legame di VCAM-1 con le integrine dei leucociti attiva cascate di segnalazione intracellulare, inclusa l'attivazione dei canali del calcio e della piccola GTPasi RAC1, promuovendo la migrazione transendoteliale delle cellule immunitarie.
• VCAM-1 funziona anche come punto di controllo della qualità per l'ingresso nel midollo osseo, fornendo un segnale "non mangiarmi" nel contesto della presentazione di MHC di classe I, prevenendo la fagocitosi delle cellule ematopoietiche vitali.
• La proteina esiste in più isoforme grazie allo splicing alternativo; la forma canonica è una proteina transmembrana di circa 81 kDa, anche se una forma solubile di 38 kDa può essere generata per distacco o splicing alternativo.
• Subcellolarmente, VCAM-1 è localizzata sulla membrana cellulare e può essere rilasciata in forma secreta; è altamente espressa sull'endotelio vascolare infiammato, nonché su tipi cellulari macrofagi e dendritici sia in tessuti normali che infiammati, e nel midollo osseo.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di legami disolfuro e ubiquitinazione; la proteina contiene domini simili alle immunoglobuline e un'elica transmembrana, classificandola come membro della superfamiglia delle immunoglobuline.
• In condizioni fisiologiche, l'espressione di VCAM-1 è indotta da citochine come TNF-α e IL-1, e la sua sovraregolazione è un segno distintivo delle malattie infiammatorie, rendendola un target prezioso per la ricerca diagnostica e terapeutica.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare N-terminale (amminoacidi 25-310), che include il primo dominio simile all'immunoglobulina coinvolto nel legame con l'integrina; questo progetto favorisce il riconoscimento dell'epitopo extracellulare nativo su cellule vive, adatto per la citometria a flusso senza permeabilizzazione.
• è un colorante fluorescente rosso brillante; quando si progettano pannelli multicolore, evitare la sovrapposizione spettrale con PE, Texas Red e fluorofori simili. Si consiglia di utilizzare controlli di compensazione adeguati.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per la colorazione specifica su linee cellulari di topo o cellule primarie che esprimono VCAM-1, come le cellule endoteliali bEnd.3 trattate con TNF-α o i macrofagi derivati dal midollo osseo.
• Si raccomanda l'uso di un colorante di vitalità vivo/morto per escludere le cellule morte, poiché le cellule danneggiate possono mostrare un legame non specifico. Includere un controllo dell'isotipo o un blocco Fc per minimizzare il fondo.
• La reattività crociata è confermata per il topo; le prestazioni su altre specie non sono garantite. Se utilizzato in tessuti, validare con controlli positivi e negativi adeguati.

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