Anticorpo monoclonale Anti-VCP di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - P55072

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di VCP

• ATPasi del reticolo endoplasmatico transizionale (indicata anche come p97 o VCP) che funziona come chaperone e segregasi omoesamerica in vari percorsi cellulari.
• Centrale per il sistema ubiquitina-proteasoma: il complesso UFD1-VCP-NPLOC4 lega le proteine mal ripiegate ubiquitinate e le esporta dal RE per la degradazione citosolica.
• Critico per la dinamica del Golgi: necessario per la frammentazione mitotica e il riassemblaggio post-mitotico degli stack del Golgi, e facilita la gemmazione delle vescicole dal RE transizionale.
• Reclutato alle rotture del doppio filamento di DNA in modo dipendente da RNF8/RNF168, promuovendo l'accumulo di TP53BP1 e contribuendo alla riparazione del DNA. (PubMed:22020440, PubMed:22120668) Riferimenti correlati: PMID:22020440 PMID:22120668
• Essenziale per l'autofagia: necessario per la maturazione degli autofagosomi contenenti ubiquitina e media l'estrazione di G3BP1 dai granuli di stress per eliminare gli aggregati. (PubMed:20104022, PubMed:27753622, PubMed:38762759, PubMed:29804830, PubMed:34739333) Riferimenti correlati: PMID:20104022 PMID:27753622 PMID:38762759 PMID:29804830 PMID:34739333
• Regola negativamente la produzione di interferone di tipo I interagendo con RIGI ubiquitinato, reclutando RNF125 per promuovere la degradazione di RIGI. (PubMed:26471729) Riferimenti correlati: PMID:26471729
• Localizzazione subcellulare: Trovato nel citoplasma, citosol, reticolo endoplasmatico, nucleo e granuli di stress, coerente con i suoi ruoli multifunzionali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1-100 di VCP umano (P55072). Si prevede che questa regione N-terminale generi un anticorpo che riconosce VCP a lunghezza intera (~89 kDa) nei western blot denaturanti.
• Per il WB, utilizzare condizioni riducenti standard; il peso molecolare previsto è 89 kDa, ma modifiche post-traduzionali possono causare lievi spostamenti. Validare il caricamento con controlli appropriati.
• Per IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate; si prevede che l'anticorpo rilevi VCP nelle sue localizzazioni riportate (citoplasma, RE, nucleo, granuli di stress).
• In ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento sensibile di VCP ricombinante o nativo; considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento per saggi sandwich.
• È stata dimostrata la reattività incrociata con VCP di topo e ratto, rendendolo adatto per studi su queste specie; tuttavia, eseguire una validazione specifica per specie nel proprio sistema modello.
• Come per qualsiasi anticorpo monoclonale, la coerenza tra lotti è tipica, ma titolare e convalidare sempre nel contesto della propria applicazione specifica utilizzando controlli positivi e negativi.

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