Anticorpo Policlonale Anti Recettore VEGF 2 per WB, ELISA - P35968

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Recettore VEGF 2

• Il Recettore VEGF 2 (VEGFR2), noto anche come KDR, FLK-1 o CD309, è un recettore tirosin-chinasico transmembrana che agisce come mediatore principale dell'angiogenesi indotta da VEGFA e della permeabilità vascolare. Lega anche VEGFC e VEGFD, svolgendo ruoli essenziali nello sviluppo vascolare e nell'ematopoiesi embrionale.
• Come regolatore chiave della biologia delle cellule endoteliali, VEGFR2 promuove la proliferazione, la sopravvivenza, la migrazione e la differenziazione delle cellule endoteliali, ed è fondamentale per la riorganizzazione del citoscheletro di actina.
• L'attivazione di VEGFR2 innesca molteplici cascate di segnalazione a valle, tra cui la via MAPK/ERK, la via AKT1 e la mobilizzazione del calcio mediata da PLCG1. Phosphoryla anche PIK3R1, NOS3, SRC e PTK2/FAK1, collegandolo alla produzione di ossido nitrico e alla dinamica delle adesioni focali.
• Il gene KDR umano codifica diverse isoforme. L'isoforma 1 è il recettore full-length, mentre le isoforme prive del dominio transmembrana (isoforme 2 e 3) agiscono come recettori esca solubili, regolando negativamente la linfangiogenesi sequestrando VEGFA e VEGFC.
• VEGFR2 è localizzato prevalentemente sulla membrana cellulare, ma viene rilevato anche nelle giunzioni cellulari, nel citoplasma, nel nucleo, nel reticolo endoplasmatico, negli endosomi precoci e può essere secretato, riflettendo le sue dinamiche di traffico e i suoi ruoli di segnalazione.
• È ampiamente espresso, viene rilevato a livello proteico nella cornea ed è soggetto a numerose modifiche post-traduzionali per fosforilazione, glicosilazione e ubiquitinazione, come indicato dalle parole chiave di UniProt.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1150-1250 del dominio intracellulare C-terminale. Questa regione è distante dai principali siti di fosforilazione noti e dovrebbe essere accessibile sia in condizioni denaturate (WB) che native (ELISA). È comunque necessario verificare la disponibilità dell'epitopo nel proprio specifico sistema di campioni.
• Il peso molecolare predetto di VEGFR2 umano è 151,5 kDa (UniProt) / 152 kDa (fornitore), con una potenziale glicosilazione che causa una migrazione a masse apparenti maggiori. Per il WB, utilizzare gel con percentuale sufficientemente alta e includere marcatori di peso molecolare appropriati per risolvere il recettore maturo.
• Questo anticorpo mostra reattività crociata con VEGFR2 di topo e ratto, rendendolo adatto per studi su più specie. Se possibile, confermare la specificità per il bersaglio nel vostro organismo modello mediante controlli di knockdown o knockout.
• Per ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo sia come capture che come rilevazione in formato sandwich se abbinato a un anticorpo monoclonale o policlonale non competitivo rivolto a un epitopo diverso. Si consiglia di eseguire titolazioni a scacchiera standard.
• Trattandosi di un anticorpo policlonale, possono verificarsi lievi variazioni da lotto a lotto. Includere controlli di riferimento interni per garantire la riproducibilità tra gli esperimenti e validare ogni nuovo lotto prima dell'uso su larga scala.

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