Anticorpo policlonale Anti-VEGFB per WB, IF/ICC, ELISA - P49765

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della VEGFB

• Il fattore di crescita endoteliale vascolare B (VEGFB) è un fattore di crescita secreto che promuove la proliferazione e la sopravvivenza delle cellule endoteliali, svolgendo un ruolo chiave nell'angiogenesi e nell'omeostasi vascolare.
• La VEGFB esiste come due isoforme principali, VEGF-B167 e VEGF-B186, generate da splicing alternativo; entrambe le isoforme condividono una regione N-terminale comune ma differiscono nei loro domini C-terminali.
• VEGF-B167 si lega all'eparina e alla neuropilina-1 con alta affinità, mentre il legame della neuropilina-1 con VEGF-B186 è regolato dalla elaborazione proteolitica.
• La proteina è classificata come glicoproteina con legami disolfuro, caratteristica della famiglia di fattori di crescita VEGF/PDGF, e funge da mitogeno per le cellule endoteliali.
• A livello subcellulare, la VEGFB viene secreta nello spazio extracellulare, dove può interagire con i recettori sulle cellule bersaglio per attivare le vie di segnalazione a valle.
• L'analisi dell'espressione tissutale rivela che la VEGFB è ampiamente espressa, con i livelli più alti nel cuore, nel muscolo scheletrico e nel pancreas; è assente nel fegato.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per produrre questo anticorpo copre gli aminoacidi 30-121 della VEGFB umana, una regione ben conservata tra le due isoforme e tra le specie, il che può contribuire alla reattività incrociata osservata con topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), considerare l'utilizzo di un tampone di campione riducente e rilevare una banda a circa 22 kDa, corrispondente alla forma monomerica matura; tuttavia, possono essere osservati anche dimeri o varianti glicosilate.
• L'immunofluorescenza (IF/ICC) potrebbe richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di fissazione e permeabilizzazione, poiché la VEGFB è una proteina secreta; l'incubazione con un inibitore del trasporto proteico può migliorare la colorazione intracellulare.
• Le prestazioni ELISA devono essere validate con appropriati standard ricombinanti di VEGFB e matrici di campione, poiché l'anticorpo è una preparazione policlonale e può presentare variabilità da lotto a lotto.
• Titolare sempre l'anticorpo nel proprio sistema sperimentale specifico per determinare la diluizione di lavoro ottimale e includere appropriati controlli positivi e negativi.

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