Anticorpo policlonale di coniglio anti-Versican per WB, IF-P, ELISA - P13611

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Versican

• La versicana è un grande proteoglicano solfato di condroitina (conosciuto anche come CSPG2) che media la segnalazione intercellulare, collega le cellule alla matrice extracellulare e regola la motilità, la crescita e la differenziazione cellulare.
• Si lega all'acido ialuronico con elevata affinità, contribuendo all'organizzazione e all'idratazione della matrice e influenzando processi come la morfogenesi e la riparazione dei tessuti.
• Lo splicing alternativo produce quattro isoforme principali (V0, V1, V2, V3) con espressione tessuto-specifica: V0 e V1 sono ampiamente espressi nel cervello e in vari tumori, V2 è limitato al cervello normale e ai gliomi, mentre V3 è assente solo nei medulloblastomi. Riferimenti correlati: PMID:8627343
• Secernuta nello spazio extracellulare, la versicana si localizza in matrici specializzate come la matrice interfotorecettore, i segmenti esterni dei fotorecettori e le ciglia, sottolineando il suo ruolo nella biologia sensoriale e strutturale.
• La versicana è rilevata nella placenta (PubMed:32337544), nel liquido cerebrospinale, nei fibroblasti e nelle urine (PubMed:25326458; PubMed:36213313), nella retina (PubMed:29777959) e nella sostanza bianca cerebrale (PubMed:2469524), riflettendo la sua distribuzione ampia ma compartimentalizzata. Riferimenti correlati: PMID:32337544 PMID:25326458 PMID:36213313 PMID:29777959 PMID:2469524
• Le caratteristiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e legami disolfuro; i motivi di dominio (simile EGF, immunoglobulina, Sushi, lectina di tipo C) e il legame del calcio implicano la versicana in diverse interazioni molecolari.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1400–1586 all'interno del dominio G3 C-terminale; verificare la rilevazione di tutte le isoforme rilevanti nel proprio sistema sperimentale mediante analisi parallela di standard ricombinanti o controlli isoforma-specifici.
• Per Western blot, utilizzare gel di poliacrilammide a bassa percentuale (4–6%) e un trasferimento umido esteso per accogliere la proteina full-length di ~373 kDa; il trattamento con condroitinasi ABC può aiutare a risolvere la dimensione della proteina core rimuovendo le catene di glicosaminoglicano.
• Nell'immunofluorescenza su campioni inclusi in paraffina (IF-P) o su campioni cellulari, ottimizzare la fissazione e considerare una permeabilizzazione mite per preservare l'architettura della matrice extracellulare; includere un controllo negativo appropriato.
• Durante lo sviluppo di saggi ELISA, accoppiare l'anticorpo con un anticorpo di rilevazione corrispondente e validarlo rispetto alla versicana ricombinante o ai lisati di tessuto per confermare sensibilità e specificità.

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