Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Villin-1 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P09327

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Villin-1

• Il Villin-1 (VIL1, noto anche come VIL o D2S1471) è una proteina di modifica dell'actina specifica delle cellule epiteliali codificata dal gene VIL1 nell'uomo.
• Regola la dinamica dell'actina nucleando la polimerizzazione dell'actina, raggruppando i filamenti di actina, tappando le estremità a barba e recidendo i filamenti; queste attività sono modulate da Ca²⁺, fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2) e acido lisofosfatidico (LPA).
• Il Villin-1 è un componente strutturale principale dei microvilli nelle cellule epiteliali intestinali e dei tubuli prossimali renali ed è presente anche nei microvilli canalicolari degli epatociti.
• A livello subcellulare, si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro e nelle punte e negli astri di diverse proiezioni cellulari ricche di actina, inclusi microvilli, filopodia, lamellipodia e ruffles di membrana.
• Svolge ruoli critici nel mantenimento della morfologia delle cellule epiteliali, nella promozione della migrazione e invasione cellulare e nella protezione contro l'apoptosi nell'epitelio gastrointestinale, probabilmente preservando l'integrità mitocondriale.
• Il Villin-1 potenzia la motilità delle cellule epiteliali, la chemiotassi e la riparazione delle ferite indotte dal fattore di crescita degli epatociti (HGF).
• Durante l'infezione da Shigella flexneri, la sua attività di recisione dell'actina viene sfruttata per migliorare la motilità batterica e la disseminazione all'interno della cellula ospite.
• La proteina subisce splicing alternativo e fosforilazione; il legame con LPA innesca la fosforilazione mediata da SRC, che inibisce tutte le funzioni di modifica dell'actina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno consiste nella proteina completa Villin-1 umana (aminoacidi 1-827), consentendo all'anticorpo di riconoscere potenzialmente sia le forme non fosforilate che quelle fosforilate; validare il rilevamento degli stati fosforilati rilevanti nel proprio sistema modello.
• Per il Western blot (WB), ci si aspetta una singola banda intorno a 93 kDa; l'anticorpo è reattivo con campioni umani, murini e di ratto, rendendolo adatto per studi interspecie.
• Per l'immunofluorescenza su cellule fissate/permeabilizzate (IF-P), il Villin-1 etichetterà tipicamente i microvilli e altre proiezioni ricche di actina; ottimizzare le condizioni di fissaggio e permeabilizzazione per il proprio tipo cellulare.
• Per l'immunoistochimica su sezioni paraffinate (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; testare protocolli standard a base di citrato o EDTA.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo di questo anticorpo come reagente di cattura o rilevamento; abbinarlo a un anticorpo di rilevamento compatibile per i formati a sandwich.

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