Anticorpo Monoclonale Anti-Villin per WB, IHC-P, ELISA - P09327

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Villin

• La Villin-1 (VIL1) è una proteina specifica delle cellule epiteliali che modifica l'actina e regola la riorganizzazione dei filamenti di actina dei microvilli; lo splicing alternativo produce molteplici isoforme.
• Aggrega, incappa, taglia e nuclea i filamenti di actina, svolgendo un ruolo centrale nella dinamica del citoscheletro di actina nei microvilli dell'orletto a spazzola.
• La sua attività è strettamente regolata da Ca²⁺ e fosfoinositidi: il PIP₂ inibisce l'incappamento e il taglio ma potenzia l'aggregazione, mentre il legame con LPA promuove la fosforilazione mediata da SRC e inibisce tutte le funzioni di modifica dell'actina.
• A livello subcellulare, la villin si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro e nelle sporgenze cellulari ricche di actina, inclusi microvilli, punte di filopodi, lamellipodi e ruffles.
• L'espressione tissutale è altamente ristretta alle cellule epiteliali; è un componente principale dei microvilli nell'epitelio intestinale, nelle cellule del tubulo prossimale renale e nei microvilli canalicolari degli epatociti.
• Oltre al rimodellamento del citoscheletro, la villin regola la morfologia, l'invasione, la migrazione e l'apoptosi cellulare; protegge dall'apoptosi epiteliale indotta da DSS mantenendo l'integrità mitocondriale.
• In seguito all'infezione da Shigella flexneri, l'attività di taglio dell'actina della villin facilita la disseminazione batterica potenziando la motilità basata sull'actina.
• Ulteriori parole chiave includono incappamento dell'actina, legame all'actina, apoptosi, calcio, sporgenza cellulare, fosfoproteina e domini ripetuti, riflettendo la sua natura multifunzionale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, è attesa una singola banda a circa 93 kDa nei lisati epiteliali; considerare l'uso di estratti di tessuto intestinale o renale come controlli positivi.
• Nell'immunoistochimica (paraffina), verificare la specificità della colorazione in sezioni intestinali umane, di topo o ratto a causa dell'elevata espressione di villin negli orletti a spazzola.
• L'immunogeno copre quasi tutta la lunghezza della villin (aa 1–827), suggerendo il riconoscimento di epitopi multipli; convalidare il rilevamento nel proprio sistema campione specifico se si lavora con varianti di splicing o frammenti.
• Per l'ELISA, la proteina villin ricombinante può fungere da antigene di rivestimento; si consiglia la titolazione dell'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• La reattività crociata con topo e ratto rende questo anticorpo adatto per studi su modelli roditori; tuttavia, confermarne le prestazioni nelle proprie condizioni sperimentali.

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