Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Vinculina [Convalidato KD] per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P18206

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Vinculina

• La Vinculina è una proteina legante i filamenti di actina (F-actina) codificata dal gene VCL; un isoforma specifica del muscolo, la metavinculina (MV), è generata da splicing alternativo.
• È essenziale sia per l'adesione cellula-matrice che per l'adesione cellula-cellula, regolando l'espressione di E-caderina sulla superficie cellulare e potenziando la meccanosensibilità del complesso E-caderina.
• La Vinculina si localizza in molteplici strutture subcellulari, incluse le giunzioni aderenti, le adesioni focali, il citoscheletro, il sarcolemma, i podosomi e il citoplasma perinucleare.
• La proteina è soggetta ad acetilazione, fosforilazione e palmitoilazione, che probabilmente ne modulano l'attività e l'associazione con la membrana.
• Varianti del gene VCL associate a malattie sono collegate a cardiomiopatie; la metavinculina è specificamente implicata in disturbi muscolari come la cardiomiopatia dilatativa (CMD1W) e la cardiomiopatia ipertrofica (CMH15).
• La Vinculina svolge ruoli nella morfologia e nel movimento cellulare, contribuendo al rimodellamento dinamico del citoscheletro di actina durante la migrazione.
• Studi strutturali indicano che la vinculina contiene domini ripetuti che consentono interazioni con molteplici partner di legame, fungendo da impalcatura molecolare nei siti di adesione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 1–258 della vinculina umana (regione N-terminale); pertanto, l'anticorpo può rilevare la vinculina a lunghezza intera (~124 kDa) e l'isoforma metavinculina (~150 kDa) in campioni muscolari.
• Per il Western blotting, si consiglia di utilizzare marcatori di dimensione appropriati e controlli di caricamento; considerare l'uso di lisati da linee cellulari umane, di topo o di ratto che esprimono vinculina. La convalida KD conferma la specificità, ma gli utenti finali dovrebbero verificarla nel proprio sistema sperimentale.
• Nell'immunofluorescenza e nell'immunoistochimica, la vinculina appare tipicamente come puntini distinti nelle adesioni focali e bande continue nelle giunzioni cellula-cellula. Includere controlli negativi (ad es., cellule con knockdown di vinculina) e colorazioni combinate con marcatori di adesione per confermare la localizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato sia in formato diretto che sandwich; ottimizzare empiricamente le concentrazioni di rivestimento e le condizioni di rilevamento.

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