Anticorpo policlonale anti-VIPR1 per WB, ELISA - P32241

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di VIPR1

• Il recettore 1 del polipeptide intestinale vasoattivo (VIPR1), noto anche come recettore VPAC1 o recettore di tipo II del PACAP, è un recettore accoppiato alle proteine G attivato dai neuropeptidi peptide intestinale vasoattivo (VIP) e polipeptide attivante l'adenilato ciclasi ipofisaria (PACAP). Lega VIP e PACAP27 con elevata affinità e, in misura minore, PACAP38, determinando l'attivazione della via di segnalazione dipendente dall'AMP ciclico.
  Riferimenti correlati:
  PMID:35477937
  PMID:36385145
  PMID:8179610
• Il gene VIPR1 genera molteplici isoforme attraverso lo splicing alternativo, contribuendo alla diversità funzionale.
• VIPR1 è localizzato prevalentemente nella membrana cellulare e appartiene alla famiglia dei GPCR di classe A simili alla rodopsina, caratterizzati da sette eliche transmembrana.
• I principali motivi strutturali includono ponti disolfuro e siti di glicosilazione legati all'azoto, fondamentali per il ripiegamento, il trasporto e il legame del ligando da parte del recettore.
• Espressione tissutale: altamente espresso nel polmone, nelle cellule epiteliali coliche HT-29 e nei linfoblasti B Raji; espressione moderata nel cervello, nel cuore, nei reni, nel fegato e nella placenta; non rilevato nelle cellule T CD4+ o CD8+, ma presente in alcune linee di cellule T (HARRIS, HuT 78, Jurkat, SUP-T1).
• VIPR1 media diversi processi fisiologici, tra cui il rilassamento della muscolatura liscia, la modulazione immunitaria e la regolazione del ritmo circadiano, attraverso l'accoppiamento alle proteine G e l'attivazione dell'adenilato ciclasi.
• Il recettore è stato caratterizzato strutturalmente (struttura 3D) ed è soggetto a modifiche post-traduzionali quali il clivaggio proteolitico (peptide segnale) e la glicosilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 31–150) corrisponde al dominio extracellulare N-terminale di VIPR1; considerare che l'anticorpo può riconoscere il recettore sia nella sua conformazione nativa sia in condizioni denaturanti.
• Per il Western Blot, validare l'anticorpo in condizioni sia riducenti sia non riducenti, a causa della presenza di ponti disolfuro che possono influenzare la mobilità elettroforetica. Il peso molecolare previsto è di circa 52 kDa (UniProt: 51,5 kDa), ma la glicosilazione può causare variazioni nella posizione delle bande.
• Nell'ELISA, utilizzare la proteina ricombinante (aa 31–150) o uno standard peptidico per confermare la specificità e titolare l'anticorpo per stabilire le concentrazioni di lavoro ottimali.
• La reattività crociata è stata confermata per VIPR1 umano; la reattività con altre specie o con recettori strettamente correlati (ad esempio VIPR2) deve essere valutata se i modelli sperimentali differiscono.

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