Anticorpo policlonale di coniglio anti-fattore di von Willebrand (VWF) per WB/IHC-P/ELISA - P04275

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del fattore di von Willebrand

• Il fattore di von Willebrand (VWF) è una glicoproteina plasmatica multimera essenziale per l'emostasi, che funge da ponte molecolare tra il collagene subendoteliale e il recettore piastrinico GPIb-IX-V, promuovendo l'adesione delle piastrine nei siti di lesione vascolare.
• Il VWF svolge inoltre la funzione di chaperone per il fattore VIII della coagulazione, stabilizzandone la struttura eterodimerica e proteggendolo dalla rimozione prematura dal plasma.
• Codificata dal gene VWF (GeneID: 7450) sul cromosoma 12, la proteina viene sintetizzata come preproproteina di 2813 amminoacidi, che subisce un'ampia elaborazione post-traduzionale, inclusi glicosilazione e multimerizzazione.
• La proteina viene secreta e si localizza nello spazio extracellulare, dove costituisce parte della matrice extracellulare e circola nel plasma.
• Il VWF contiene numerosi domini funzionali, inclusi i domini A, che mediano le interazioni con la glicoproteina piastrinica Ib e il collagene.
• Le mutazioni nel gene VWF sono associate alla malattia di von Willebrand (VWD), un disturbo emorragico caratterizzato da una compromissione dell'adesione piastrinica e da livelli ridotti del fattore VIII.
• Lo splicing alternativo del trascritto VWF genera molteplici isoforme, sebbene il significato funzionale di molte varianti sia ancora oggetto di studio.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 2645-2813, una regione C-terminale del VWF. Questa sequenza può rilevare tutte le principali isoforme nelle applicazioni di Western blot denaturante (WB).
• Per IHC-P, è necessario ottimizzare i metodi di recupero antigenico e la diluizione dell'anticorpo, poiché il VWF è espresso abbondantemente nell'endotelio vascolare e nelle piastrine.
• Nell'ELISA, si consiglia di associare questo anticorpo policlonale a un anticorpo di cattura diretto contro un epitopo non sovrapposto, per evitare la competizione.
• A causa dell'elevato peso molecolare (309 kDa) del VWF maturo, utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale (5–6%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire una rilevazione efficace.
• Data la natura multimera del VWF, per risolvere le forme monomeriche nel WB si raccomanda l'uso di agenti riducenti (ad es. DTT); le condizioni non riducenti possono evidenziare pattern a scala multimera.

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