Anticorpo policlonale di coniglio anti-VPRBP per WB, ELISA - Q9Y4B6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di VPRBP (fattore 1 associato a DDB1 e CUL4)

• Il gene DCAF1 codifica VPRBP (nota anche come fattore 1 associato a DDB1 e CUL4, proteina legante Vpr di HIV-1 o serina/treonina-proteina chinasi VPRBP), una proteina di grandi dimensioni con molteplici isoforme (osservate a 118, 168 e 169 kDa) dovute allo splicing alternativo. Appartiene alla famiglia DCAF, caratterizzata da ripetizioni WD40 e da un dominio cromogeno.
• VPRBP funziona come subunità di riconoscimento del substrato del complesso della ligasi E3 dell'ubiquitina CUL4A-RBX1-DDB1 (complesso DCX). Questo complesso media l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomica di proteine bersaglio come NF2 e substrati metilati, riconosciuti tramite il dominio cromogeno. Riferimenti correlati: PMID:23063525
• Come parte del complesso EDVP, VPRBP dirige l'ubiquitinazione della TERT, portando all'inibizione della telomerasi, e della CCP110, influenzando la biologia dei centrosomi. Riferimenti correlati: PMID:19287380 PMID:23362280 PMID:28242748 PMID:34259627
• VPRBP agisce come una chinasi atipica della serina/treonina che fosforila specificamente l'istone H2A in Thr-120 (H2AT120ph) in un contesto nucleosomico, reprimendo la trascrizione dei geni oncosoppressori e contribuendo all'oncogenesi. Riferimenti correlati: PMID:24140421
• Attraverso l'interazione con LLGL1 e LLGL2, VPRBP partecipa all'apoptosi mediata da JNK durante la competizione cellulare, influenzando l'omeostasi tissutale. Riferimenti correlati: PMID:20644714
• A livello subcellulare, VPRBP si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei centrosomi (centri organizzatori dei microtubuli), in accordo con i suoi ruoli nell'ubiquitinazione nucleare e nella segnalazione citoplasmatica.
• VPRBP è espressa ubiquitariamente, riflettendo le sue funzioni fondamentali nel controllo del ciclo cellulare, nella regolazione della cromatina e nelle risposte allo stress.
• Nel contesto dell'infezione virale, VPRBP viene dirottata da Vpr di HIV-1 e Vpx di HIV-2 per reindirizzare l'attività della ligasi E3 cellulare, portando alla degradazione delle proteine dell'ospite e facilitando la replicazione virale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1058–1396 nella regione C-terminale di VPRBP. Si consiglia di validare il rilevamento delle isoforme e la potenziale reattività crociata con altri membri della famiglia DCAF.
• Il Western blot può rivelare bande multiple (118, 168 e 169 kDa) dovute allo splicing alternativo e alle modifiche post-traduzionali. Utilizzare marcatori proteici appropriati e validare nel sistema di lisato cellulare o tissutale pertinente.
• Per l'ELISA, ottimizzare empiricamente la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la titolazione dell'anticorpo; la natura policlonale può richiedere un bloccaggio rigoroso per ridurre il fondo.
• È riportata una reattività crociata con il topo; tuttavia, confermare la specificità nel tipo di campione murino previsto, soprattutto considerando le possibili variazioni di sequenza.

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